EFAR - Escola de Farmácia

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O curso de Farmácia em Ouro Preto foi criado em 1839, sendo a mais antiga Escola de Farmácia da América Latina.

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Estudo fitoquímico e atividades biólogicas de extratos etanólicos especiés Nectandra nitidula, Curatella americana e Albizia niopoides.
(2019) Lima, Lienne D’Auria; Brandão, Geraldo Célio; Teixeira, Luiz Fernando de Medeiros; Magalhães, José Carlos de; Santos, Orlando David Henrique dos; Brandão, Geraldo Célio
Foi realizada uma triagem fitoquímica preliminar de extratos das espécies Curatella americana, Nectandra nitidula e Albizia niopoides ocorrentes no estado de Minas Gerais. Os extratos foram preparados via percolação exaustiva a frio com etanol (92,8o GL), os principais metabólitos secundários foram identificados por cromatografia em camada delgada comparando-se com amostras de referência, e pela técnica de cromatografia líquida de ultra eficiência acoplada a ultravioleta, espectrometria de massa (CLUE-UV-EM) e espectrometria de massa sequencial (EMEM). Os principais constituintes identificados foram flavonoides da classe flavonol para a espécie Curatella americana e alcaloides da espermidina para a espécie Albizia niopoides. O extrato de folhas de C. americana foi submetido a um fracionamento por partição líquido-líquido, utilizando solventes de polaridade crescente. A fração em acetato de etila foi refracionada por cromatografia de exclusão molecular utilizando resina de Sephadex LH-20, e por cromatografia em coluna de sílica gel de fase reversa ligada a octadecilsilano (C18), e obteve dois sólidos isolados denominados CAFAE-1 e CAFAE-2. Neste trabalho foram realizados ensaios que permitiram a avaliação da atividade citotóxica, anti-Zika vírus, antibacteriana e anti-Trypanosoma cruzi dos diferentes extratos. O extrato de folhas de C. Americana mostrou-se moderamente citotóxico, mas com atividade significativa contra o Zika vírus, com CE50 de 85,23 μg/mL (IS = 2,56). Adicionalmente, a fração acetato de etila também apresentou forte atividade contra o Zika vírus com CE50 de 40,72 μg/mL (IS = 1,38), enquanto que somente a CAFAE-1 mostrou atividade contra o Zika vírus com CE50 de 152,8 μg/mL (IS = 2,0). A espécie N. nitidula revelou-se moderadamente citotóxica e foi ativa contra o Zika vírus com CE50 104,2 μg/mL (IS = 1,38), além disso, apresentou atividade antibacteriana contra Staphylococcus spp. O extrato de caules da espécie A. niopoides mostrou-se moderamente citotóxico para linhagens de células Vero e MRC-5 com CC50 de 62,22 e 30,54 μg/mL, respectivamente. Adicionalmente, este extrato apresentou uma atividade antibacteriana significativa contra a maioria das bactérias Gram-positivas e negativas testadas. Já o extrato de folhas dessa espécie demonstrou ausência de citotoxicidade e foi o mais ativo contra as formas amastigotas de T. cruzi, demonstrando 85% de inibição desses parasitos (IS = 2,65). Portanto, conclui-se que os constituintes de média polaridade podem ser os responsáveis pela atividade anti-Zika vírus observada e que os alcaloides da espermidina podem ser os responsáveis pelas atividades biológicas observadas para a espécie Albizia niopoides.
Licnofolida livre e em formulações nanoméricas : toxicidade, atividade in vitro e in vivo contra Trypanosoma cruzi e proposta de mecanismo de ação.
(2022) Milagre, Matheus Marques; Lana, Marta de; Guimarães, Dênia Antunes Saúde; Lana, Marta de; Sachs, Daniela; Ferreira, Lucas Antônio Miranda; Silva, André Talvani Pedrosa da; Veloso, Vanja Maria
A doença de Chagas permanece epidemiologicamente relevante e é a sexta doença mais negligenciada do mundo, causando elevada morbidade e mortalidade em plena idade produtiva. O mais grave é a falta de terapia profilática e curativa adequada para esta enfermidade, sendo os únicos medicamentos atualmente utilizados o benznidazol (BZ) e nifurtimox (NIF). Estes fármacos causam graves efeitos colaterais e apresentam limitada eficácia terapêutica na fase crônica da doença, justificando a busca por novas opções terapêuticas. Este trabalho visou avançar nos estudos da lactona sesquiterpênica licnofolida (LIC-livre) e em nanocápsulas (LIC- NC) avaliando a citotoxicidade in vitro células cardíacas H9c2 e hepáticas HepG2 pelos métodos de vermelho neutro; sua interferência no ciclo celular e na produção de espécies reativas de oxigênio (EROs); genotoxicidade por ensaio cometa; fenômenos de apoptose e necrose; seletividade para T. cruzi em comparação à células H9c2; análise qualitativa da incorporação das NC fluorescente pelas células e parasitos na tentativa de explicar o mecanismo de ação de LIC-NC na infecção por T. cruzi; avaliar a toxicidade aguda in vivo da LIC-livre e LIC-NC; bem como sua eficácia terapêutica contra a cepa Colombiana de T. cruzi, protótipo de resistência ao tratamento por BZ e NIF. O tratamento com BZ foi utilizado como grupo controle de referência. No teste de vermelho neutro LIC-livre e LIC-NC apresentaram IC50 de 1,69μM e 3,28μM em células H9c2 e IC50 de 3,11μM e 3,69μM em células HepG2. Não foram observadas diferenças significativas entre as células na análise da evolução do ciclo celular, tampouco na comparação dos tratamentos com LIC-livre e LIC-NC. Verificou-se aumento nas fases sub-G1 e diminuição nas fases G2-M com ambas as formulações. Não foram observadas diferenças significativas nas análises de apoptose e necrose entre LIC-livre e LIC-NC. Em células H9c2, LIC-livre, LIC-NC, NC-BR e BZ aumentaram a produção de EROs. LIC-livre e BZ induziram aumento na intensidade da cauda nas células H9c2, diferentemente das células HepG2. Os testes em amastigota e epimastigota mostraram que LIC-livre possui maior ação tripanocida in vitro quando comparada à LIC-NC. LIC-NC foi incorporada tanto pelas células H9c2 não infectadas, quanto infectadas, e por tripomastigotas, mostrando boa entrega da formulação nos sítios de interesse. No teste de toxicidade aguda não foram observadas alterações significativas quanto aos parâmetros avaliados. LIC-NC curou 80% dos animais infectados com a cepa Colombiana, 100% resistente aos fármacos de referência, com negativação de todos os parâmetros avaliados (hemocultura, qPCR sanguínea e em tecido cardíaco após imunossupressão e ELISA). A licnofolida se mostrou eficaz em sua ação anti-T. cruzi in vitro e in vivo, na sua forma livre e nanoencapsulada, com diminuição da citotoxicidade quando encapsulada, e melhora significativa da sua ação tripanocida in vivo. LIC ainda se mostrou menos citotóxica em todos os parâmetros avaliados em relação ao grupo controle BZ. Ambas as formulações se mostraram seguras quanto ao uso em camundongos, principalmente a LIC-NC que foi também mais eficaz na cura da infecção por T. cruzi. Em conjunto, os resultados incentivam estudos complementares da LIC-NC como uma nova opção terapêutica a ser explorada e utilizada no tratamento da doença de Chagas.
Structure-activity relationship study of antitrypanosomal analogues of gibbilimbol B using multivariate analysis and computation-aided drug design.
(2023) Leão, Luiz Paulo Melchior de Oliveira; Vieira, Nátalie de Barros; Oliveira, Paula P. S.; Paula, Daniela Aparecida Chagas de; Soares, Marisi Gomes; Souza, Thiago Belarmino de; Zanin, João Luiz Baldim; Silva, Thais Alves da Costa; Cardoso, André Gustavo Tempone; Dias, Danielle Ferreira; Lago, João Henrique Ghilardi
Gibbilimbol B and analogues were isolated from the Brazilian plant Piper malacophyllum and displayed activity against trypomastigote forms of Trypanosoma cruzi as well as reduced toxicity against NCTC cells. These results stimulated the preparation of a series of 24 chemically related analogues to study the potential of these com- pounds against T. cruzi trypomastigotes and explore structure–activity relationships. Initially, 12 compounds were planned, maintaining the same extension of the linear side chain of gibbilimbol B and unsaturation on the C-4 position but changing the functional groups – ester and amide – and variating the substituent at the p-po- sition in the aromatic ring. Other 12 compounds were prepared using a branched side chain containing an ethyl group at the C-2 position. Overall, these structurally-related analogues demonstrated promising activity against trypomastigote forms (EC50 < 20 μM) and no mammalian cytotoxicity to fibroblasts (CC50 > 200 μM). Using multivariate statistics and machine learning analysis, aspects associated with structure/activity were related to their three-dimensional structure and, mainly, to the substituents on the aromatic ring. Obtained results sug- gested that the presence of t-butyl or nitro groups at p-position with appropriate side chains causes an alteration in the electron topological state, Van der Waals volumes, surface areas, and polarizabilities of tested compounds which seem to be essential for biological activity against T. cruzi parasites.
From rational design to serendipity : discovery of novel thiosemicarbazones as potent trypanocidal compounds.
(2022) Braga, Saulo Fehelberg Pinto; Santos, Viviane Corrêa; Vieira, Rafael Pinto; Silva, Elany Barbosa da; Monti, Ludovica; Krake, Susann Hannelore; Martinez, Pablo D. G.; Dias, Luiz Carlos; Caffrey, Conor R.; Siqueira Neto, Jair Lage de; Oliveira, Renata Barbosa de; Ferreira, Rafaela Salgado
Chagas disease is a major public health problem caused by Trypanosoma cruzi, with an estimated 6–7 million people infected and 70 million at risk of infection. T. brucei gambiense and T. brucei rhodesiense are two subspecies of related parasites that cause human African trypanosomiasis, a neglected tropical disease with also millions of people at risk of infection. Pharmacotherapy for both diseases suffers from low efficacy, side effects, or drug resistance. Recently, we reported a noncovalent competitive inhibitor of cruzain (IC50 26 μM, Ki 3 μM) and TbrCatL (IC50 50 μM), two cysteine proteases considered promising drug targets for trypanosomiasis. Here, we describe the design and synthesis of derivatives of our lead compound. The new thiosemicarbazone derivatives showed potency in the nanomolar concentration range against the two enzymes, but they were later charac- terized as aggregators. Nevertheless, the thiosemicarbazone derivatives showed promising antiparasitic activities against T. b. brucei (EC50 13–49.7 μM) and T. cruzi (EC50 0.027–0.59 μM) under in vitro conditions. The most active thiosemicarbazone was 200-fold more potent than the current anti-chagasic drug, benznidazole, and showed a selectivity index of 370 versus myoblast cells. We have identified an excellent candidate for further optimization and in vivo studies.
The entrance route : oral, mucous, cutaneous, or systemic has a marked influence on the outcome of Trypanosoma cruzi experimental infection.
(2022) Gonçalves, Karolina Ribeiro; Mazzeti, Ana Lia; Nascimento, Alvaro Fernando da Silva do; Lacerda, Jéssica Mara Castro; Paiva, Nívia Carolina Nogueira de; Mathias, Fernando Augusto Siqueira; Reis, Alexandre Barbosa; Caldas, Sérgio; Bahia, Maria Terezinha
In recent decades, the oral infection of Trypanosoma cruzi has gathered increased attention due to frequent outbreaks that can lead to more severe clinical signs than those usually found in the areas of vector transmission. This study addresses the main routes of infection using metacyclic trypomastigotes (MT) and blood trypomastigotes (BT). Herein, BALB/c mice were infected with the Colombian (TcI) strain via intraperitoneal (IP), oral, intragastric (IG), ocular (OC) and cutaneous (CT) routes with 106 culture-derived MT or BT. Parasitemia was intermittent and low in animals inoculated with MT, in contrast, high parasitemia levels were found in BT-mice. A tropism for the muscles was observed in oral or IG infection with BT. Differently, the parasite was widely distributed in the tissues of mice infected with MT. However, the intensity of the inflammation infiltrating the tissues was higher in oral or IG infection with BT. Animals inoculated with BT via the IG route had similar serum levels of IFN-γ and smaller IL-10 compared to those infected with MT via the IG route. TNF-α levels were higher in the serum from BT-animals, which could explain the higher intensity of heart inflammation in these animals. Our results suggest that the infective form and the route of infection differentially modulated the outcome of Trypanosoma cruzi mice infection.
Otimização de derivado triazólico do 2-metoxi-4-propilfenol (di-hidroeugenol) : síntese de novas substâncias, avaliação biológica e estudos de modelagem molecular.
(2022) Reis, Rúbia Castro Fernandes Melo; Souza, Thiago Belarmino de; Braga, Saulo Fehelberg Pinto; Souza, Thiago Belarmino de; Bernardes, Lílian Sibelle Campos; Mosqueira, Vanessa Carla Furtado
A doença de Chagas ainda afeta cerca de 6 milhões de pessoas no mundo, sendo considerada uma doença endêmica em muitos países, sobretudo na América Latina. O tratamento para essa doença no Brasil é restrito a dois fármacos, benznidazol e nifurtimox, ambos com limitações tanto no que diz respeito à toxicidade quanto à sua ineficácia na fase crônica da doença. Os produtos naturais, dentre eles o eugenol e seus derivados, ganham destaque por apresentarem diversas atividades biológicas, incluindo atividade antiparasitária. Além disso, relatos na literatura relacionam derivados contendo um núcleo 1,2,3-triazólico a uma promissora atividade tripanocida, dentre eles um derivado 1,2,3-triazólico do di-hidroeugenol recentemente descoberto por nosso grupo de pesquisas, que apresentou resultados tripanocidas promissores in vitro e in vivo. Estudos de docking molecular realizados no trabalho mostraram uma afinidade desse derivado pela cruzaína, uma enzima lisossomal importante para a sobrevivência do Trypanosoma cruzi no hospedeiro. Somados, esses resultados tornam o derivado citado acima um hit para possíveis modificações moleculares e apontam a enzima cruzaína como um importante alvo molecular do T. cruzi. Diante disso, no presente trabalho foi proposta a otimização deste derivado 1,2,3-triazólico a partir de uma síntese convergente entre diferentes alquilazidas derivadas do eugenol (e seus análogos) com alquilfenóis contendo um alcino terminal, via reação click, além de outras modificações em sua estrutura, que originaram 20 substâncias puras inéditas. Os resultados de docking molecular apontaram, novamente, a enzima cruzaína como um forte candidato a alvo molecular de ação dessas substâncias, principalmente por apresentarem melhores pontuações quando comparadas a dois outros alvos avaliados, tripanotiona redutase e CYP51. Quanto aos resultados da avaliação do potencial tripanocida e citotóxico das substâncias sintetizadas, destacam-se os triazóis 21, 26, 27 e 28, com valores de CI50 abaixo de 53 M (resultado apresentado pela substância protótipo). Dentre elas, a substância 27, derivada do di-hidroeugenol e contendo um grupo nitro, apresentou CI50= 7,32 M e índice de seletividade de 77,62, superior aos valores encontrados para o protótipo e para o benznidazol, neste ensaio.
Avaliação da atividade anti-Trypanosoma cruzi in vitro e in vivo do composto silibinina isolado e associado ao benznidazol.
(2019) Torchelsen, Fernanda Karoline Vieira da Silva; Lana, Marta de; Silva, Glenda Nicioli da; Murta, Silvane Maria Fonseca; Brandão, Geraldo Célio; Lana, Marta de
A doença de Chagas (DC) é uma doença parasitária endêmica na América Latina e encontrada em diversos países no mundo. Seu tratamento é feito com o benznidazol (BZ) e o nifurtimox (NF), ambos fármacos com baixa eficácia terapêutica na maoria dos pacientes em fase crônica tardia da DC, e que causam vários efeitos colaterais. A busca por novos fármacos para a DC é estimulada entre produtos naturais e em estratégias como associação de fármacos. A silibinina (SLB) é um composto natural capaz de inibir a proteína de efluxo (Pgp) nas membranas celulares, induzir a morte de microrganismos, além de possuir atividade anti-inflamatória. Ainda não há na literatura relato de sua atividade em T. cruzi. Neste trabalho foi avaliada a atividade in vitro e in vivo de SLB e de SLB associada a BZ (SLB+BZ) frente a cepa Y de T. cruzi. Foi realizado ensaio de citotoxicidade pelo método de MTT em células VERO (24h), que revelou IC50 de 250,22 µM para a SLB. A atividade tripanocida avaliada por método com resazurina em epimastigotas (24h) mostrou que a SLB 25 µM inibiu o crescimento dos parasitos. O ensaio em amastigotas revelou índice de seletividade de 3,13, além de mostrar a maior porcentagem de inibição (> 90%) quando a SLB foi usada na associação de SLB100+BZ10µM, em comparação com SLB (100; 25; 6,25 µM) ou BZ (10; 5; 2,5 µM) isolados. No ensaio in vivo, camundongos Swiss comprovadamente infectados IP com 10.000 tripomastigotas sanguíneos foram tratados por via oral por 20 dias consecutivos com SLB50, SLB150, SLB50+BZ25, SLB50+BZ50, SLB50+BZ100, SLB150+BZ25, SLB150+BZ50, SLB150+BZ100, BZ25, BZ50 e BZ100 mg/kg/dia. Os animais foram avaliados diariamente na fase aguda (parasitemia) e aos 90, 180 e 240 dias após tratamento por hemocultura, qPCR de eluato sanguíneo e sorologia (ELISA). Após a eutanásia, foram feitas, além das avaliações anteriores, a qPCR do tecido cardíaco. Os resultados in vivo demonstraram que a SLB em monoterapia não foi capaz de controlar a parasitemia e a mortalidade dos animais. As avaliações parasitológicas mostraram 100% de negatividade na maioria dos grupos de animais tratados com combinação de drogas ou doses menores de BZ, enquanto a sorologia foi positiva em todos os animais não sendo constatada cura pelo critério clássico. Entretanto verificamos que os grupos experimentais tratados com BZ em menores doses e que os tratados com BZ em menores doses quando associado a SLB apresentaram maior negatividade nos exames parasitológicos, porém sem diferenças significativas entre os demais grupos. Análise histopatológica cardíaca será feita para avaliar se houve redução da inflamação/fibrose entre os grupos tratados com a associação SLB+BZ versus BZ.
Benznidazole self-emulsifying delivery system : a novel alternative dosage form for Chagas disease treatment.
(2020) Mazzeti, Ana Lia; Oliveira, Liliam Teixeira; Gonçalves, Karolina Ribeiro; Schaun, Géssica C.; Mosqueira, Vanessa Carla Furtado; Bahia, Maria Terezinha
Benznidazole (BZ) tablets are a unique form of treatment available for treating Chagas disease. Development of a liquid formulation containing BZ easy to administer orally for the treatment of paediatric patients, particularly for newborns is urgently required, with the same efficacy, safety and suitable biopharmaceutical properties as BZ tablets. Self-emulsifying drug delivery systems (SEDDS) may improve bioavailability of drugs such as BZ, which have poor water solubility and low permeability. In this context, the aim of this work was to develop a liquid BZ-SEDDS formulation as an alternative to tablets and to evaluate its cytotoxicity in different host cell lines and its efficacy in experimental Trypanosoma cruzi infection in mice. The optimized SEDDS formulation (25 mg/ml of BZ) induced no cytotoxicity in H9c2, HepG2 and Caco2 cells in vitro at 25 μM level. BZ-SEDDS and free-BZ showed similar in vitro trypanocidal activity in H9c2 cells infected by T. cruzi Y strain, with IC50 values of 2.10 ± 0.41 μM and 1.29 ± 0.01 μM for BZ and BZ-SEDDS, respectively. A follow up of efficacy in an acute model of infected mice resulted in the same percentage of cure (57%) for both free-BZ and BZ-SEDDS- groups according to established parameters. Furthermore, no additional in vivo toxicity was observed in animals treated with BZ-SEDDS. Taken together, in vitro and in vivo data of BZ-SEDDS showed that the incorporation of BZ into SEDDS does not alter its potency, efficacy and safety. Thus, BZ-SEDDS can be a more practical and personalized orally administered liquid dosage form compared to suspension of crushed BZ-tablets to treat newborn and young children by emulsifying SEDDS in different aqueous liquids with advantage of dosing flexibility.
The effect of benznidazole dose among the efficacy outcome in the murine animal model. A quantitative integration of the literature.
(2020) Molina, Israel; Melo, Luísa Helena Perin de; Aviles, Augusto Sao; Vieira, Paula Melo de Abreu; Fonseca, Kátia da Silva; Cunha, Lucas Maciel; Carneiro, Cláudia Martins
Despite more than 100 years since it was firstly described Chagas disease, only two drugs are available to treat Chagas disease: Nifurtimox launched by Bayer in 1965 and benznidazole launched by Roche in 1971. Drug discovery initiatives have been looking for new compounds as an alternative to these old drugs. Although new platforms have been used with the latest technologies, a critical step on that process still relies on the in vivo model. Unfortunately, to date, available animal models have limited predictive value and there is no standardization. With the aim to better understand the role of benznidazole, the current standard of care of Chagas disease, we performed this review. We intend to analyze the influence of the experimental design of the most used animal model, the murine model, in the assessment of the efficacy endpoint.
Avaliação anti-Trypanosoma cruzi in vitro e in vivo de lactona sesquiterpênica isolada de Lychnophora passerina.
(2018) Milagre, Matheus Marques; Lana, Marta de; Guimarães, Dênia Antunes Saúde; Alves, Tânia Maria de Almeida; Vieira Filho, Sidney Augusto; Lana, Marta de
Atualmente, a única droga disponível para tratar a DCh no Brasil é o benznidazol (BZ), que apresenta várias limitações e efeitos adversos, dessa forma estimulando a busca por novas opções terapêuticas. Assim, este projeto visa o uso em solução da lactona sesquiterpênica goyazensolida (GZL), previamente ativa contra o Trypanosoma cruzi in vitro, com os seguintes objetivos: (1) Determinar o limiar de citotoxicidade in vitro sobre células de mamíferos (H9c2) e avaliar sua atividade tripanocida contra amastigotas, estabelecendo seu índice de seletividade; (2) Avaliar os sinais de toxicidade aguda in vivo e sua atividade frente à infecção experimental de T. cruzi em modelo murino. Para avaliar a citotoxicidade foram realizados os testes MTT e Vermelho Neutro (VN) e, para verificar a atividade da GZL contra o T. cruzi, células H9c2 foram infectadas com um isolado resistente da cepa Y de T. cruzi e tratadas durante 24 e 48h. Na avaliação da toxicidade aguda in vivo, foi determinada a dose máxima tolerada, feito o hemograma e dosagem de parâmetros bioquímicos para avaliação da toxicidade hepática e renal. Para avaliar a atividade terapêutica da GZL, camundongos Swiss infectados com as cepas Y e CL de T. cruzi foram tratados pelas vias oral e intravenosa (IV) por 20 dias consecutivos nas doses de 1, 5 e 25 mg/kg/dia [via oral e IV, cepa Y (isolado resistente ao BZ) e CL (sensível ao BZ)] e 1, 3 e 9 mg/kg/dia IV (cepa CL), paralelamente a grupos controles BZ 100mg/kg/dia e infectado não tratados (INT). A parasitemia dos animais foi avaliada diariamente até consistente negativação. A ação do tratamento foi avaliada ainda por exames parasitológicos (hemocultura e PCR) e sorológico (ELISA). Os resultados obtidos revelaram a citotoxicidade in vitro da GZL em concentrações acima de 250 ng/mL nos tratamentos de 24 e 48h avaliadas pelos testes MTT e VN, sendo o índice de seletividade em 24h de 351 calculado a partir da relação dos parâmetros de MTT e do teste de ação tripanocida da GZL in vitro. Houve discreta nefrotoxicidade revelada pelo aumento de creatinina observado nos animais tratados com GZL 25 mg/kg IV em relação ao grupo CNT. Na avaliação pós-tratamento em animais infectados pela cepa Y, foi observada uma diminuição significativa da parasitemia a partir do 5º dia de tratamento com GZL nas doses de 1,0 mg/kg/dia (IV e oral) e 5,0 mg/kg/dia, via oral e BZ 100 mg/kg/dia, quando comparados ao grupo controle INT. As taxas de sobrevivência dos camundongos tratados com GZL foram de 100% na dose de 5,0 mg/kg/dia oral, seguidos dos tratados com 1,0 mg/kg/dia IV e BZ 100 mg/kg/dia oral, que foram de 87,5%, enquanto o grupo controle INT apresentou 25% de sobrevida. Nenhum dos camundongos foram considerados curados segundo o critério de cura adotado (MS, 2016). Os animais infectados pela cepa CL e tratados com GZL demonstraram no 180º dia pós-tratamento uma diminuição significativa da parasitemia a partir do primeiro dia do PP em relação ao grupo INT, porém inferior ao observado no grupo tratado com BZ. A maioria dos grupos tratados não apresentou 100% de negatividade na HC e PCR simultaneamente, entretanto o grupo tratado com BZ apresentou 57,1% de cura com sobrevida de 87,5%, seguido por GZL 3 mg/kg/dia IV que curou 12,5% dos animais com sobrevida de 100%. Este resultado, em particular, aliado aos demais, representam uma boa perspectiva do uso da GZL para o tratamento da DCh a ser explorada.

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