Síntese de polilactídeo com fluorescência no infravermelho próximo para futuras aplicações nanoteranósticas.

Abstract

Os marcadores fluorescentes que absorvem na região espectral do infravermelho próximo (NIR) podem ser empregados como fotossensitizadores nas terapias fotodinâmica e fototérmica para tratamento de câncer. Além disso, essas sondas são úteis na detecção de nanocarreadores, pois permitem o rastreio do destino dessas partículas in vivo por meio de técnicas de imagem pouco invasivas. No entanto, são necessárias estratégias para garantir a estabilidade de ligação e a concentração adequada do marcador nas nanopartículas. Diante disso, o presente trabalho teve como objetivo a conjugação de um derivado carbocianina, o marcador IR780, com polilactídeos (PLA) para obtenção de um polímero que possa ser empregado em estudos pré-clínicos para avaliação da biodistribuição de nanopartículas. PLA reativos foram sintetizados via polimerização por abertura de anel (ROP) do D,L-lactídeo com um iniciador contendo um grupo ciclooctila, via catalise por octanoato de estanho ou triazabiciclodeceno (TBD). Análise da reatividade dos PLA demonstrou que apenas os polímeros obtidos por reação catalisada pelo TBD eram reativos frente a azidas orgânicas. O IR780 foi derivatizado e conjugado à PLA via reação multicomponente de cicloadição azida-alcino promovida por tensão de ciclo (SPAAC). O sucesso da reação foi confirmado por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Nanopartículas contendo o IR780 conjugado ao PLA (IR-PLA) associado a diferentes poliésteres (PCL, PLGA e PEG-PLA) foram preparadas por nanoprecipitação e caracterizadas pela técnica de fracionamento em campo de fluxo assimétrico (AF4) associada a detecção por espalhamento de luz e fluorescência (AF4-MALS-FLD). Análises por AF4-MALS-FLD demonstraram que as nanopartículas apresentam fluorescência estável, que não foi transferida para proteínas séricas quando incubadas a 37°C em meio DMEM contendo 10% de soro fetal bovino, além disso observou-se que o IR-PLA foi capaz de se associar a diferentes poliésteres, formando NP estáveis. Sendo assim, o IR-PLA mostrou ser um marcador fluorescente polimérico versátil, que pode ser associado a diferentes poliésteres biodegradáveis para a marcação dos nanocarreadores mais seguros e mais utilizados na área farmacêutica.