Expressão de pRB, ki-67 e da oncoproteína E7 do papilomavírus humano nas lesões intraepiteliais cervicais e no carcinoma epidermoide invasor.

Abstract

O câncer cervical é uma das doenças mais frequentes que acometem a população feminina. O Papilomavírus Humano de alto risco oncogênico (HR-HPV), principal fator de risco do câncer cervical, interfere no ciclo celular do hospedeiro levando à desregulacão e progressão para lesões neoplásicas. Esta interferência pode levar a indicação de marcadores úteis no prognóstico e no diagnóstico da doença. A maioria dos marcadores que vêm sendo investigados são proteínas virais, de ciclo celular e de proliferação. Assim, neste estudo foi avaliada a expressão imunoistoquímica das proteínas pRb, Ki-67 e E7-HPV nas lesões intraepiteliais cervicais e no carcinoma epidermoide invasor, correlacionando-as com a infecção por HR-HPV e a expressão imunoistoquímica de p16, p53, PCNA e L1/HPV. O trabalho foi realizado com 150 amostras de biópsias cervicais, distribuídas em Cervicite (C), Neoplasia Intraepitelial Cervical (NIC) de graus 1, 2 e 3 e Carcinoma Epidermoide Invasor (CEI). A expressão das proteínas foi avaliada pela técnica de imunoistoquímica utilizando anticorpos monoclonais anti-pRb, anti-ki-67 e anti-E7-HPV16. A pesquisa de HR-HPV foi feita por PCR tempo real que possibilitou a detecção de 14 tipos virais de alto risco oncogênico (HR-HPV). Análise inicial mostrou que as proteínas de ciclo celular, de proliferação e do HPV apresentaram associação com o grau da lesão (p<0,05), sendo pRb, p53 e L1/HPV menos expressas nas lesões mais graves (NIC3/CEI) enquanto ki-6716, PCNA e p16 foram mais expressas nessas lesões. Em relação à infecção viral, HR-HPV foi detectado em 61,3% das amostras, com predomínio de HPV 16 em NIC3/CEI e de outros tipos virais de alto risco em NIC1/NIC2. HPV 18 foi detectado apenas em amostras NIC3/CEI. A presença de HR-HPV foi associada ao diagnóstico histopatológico. Foi observada alta positividade de HPV em todas as amostras e maior frequência de HR-HPV nas lesões mais graves. Os resultados mostraram menor expressão de E7/HPV em NIC2 e CEI. Nas lesões cervicais, independente do grau, houve predomínio de E7+/HRHPV+ (NIC1 = 50,0%; NIC2 = 36,7% e NIC3 = 60,0%), exceto em CEI onde o padrão E7-/HRHPV+ foi o mais presente (43,3%). Em cervicite os padrões mais encontrados foram E7-/HRHPV- (30,8%) e E7+/HRHPV- (57,7%). Na análise de associação das proteínas de ciclo celular com o diagnóstico histopatológico foi observada significativa diminuição da expressão de pRb e aumento de p16 nas lesões mais graves nas amostras positivas para HR-HPV e E7/HPV. A avaliação do desempenho diagnóstico apontou que a associação do teste de pRb com p16 (A: NIC1+ = 87,0%) ou com HR-HPV (A: NIC1+ = 80,8%) tiveram as melhores acurácias para diferenciar lesões NIC1+. A associação do teste de pRb com o de L1/HPV (A: NIC2+ = 80,1%) apresentou desempenho satisfatório na avaliação de NIC2+. Os resultados sugerem que a análise de pRb, p16 e HR-HPV, isolados ou associados, podem ser úteis como possíveis marcadores auxiliando na diferenciação dos graus das lesões intraepiteliais cervicais.