PPBIOTEC - Programa de Pós-graduação em Biotecnologia
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Item Bactérias cultiváveis obtidas a partir de Langsdorffia hypogaea como potenciais controladores biológicos de fungos saprofíticos associados com deterioração de tomate pós-colheita.(2021) Silva, Ana Karla da; Moreira, Leandro Marcio; Sanchez, Angelica Bianchini; Moreira, Leandro Marcio; Garcia, Camila Carrião Machado; Laia, Marcelo Luiz deGrandes quantidades de frutos e vegetais são perdidos por consequência da ação de fungos que os deterioram na fase de pós-colheita. Fatores como cultivo inapropriado, vasto uso de agrotóxicos, armazenamento, manuseio, transporte inadequados e grandes variações de temperatura podem favorecer o aparecimento e a propagação de doenças fúngicas alavancando a fase de deterioração. O tomate, por exemplo, por ser uma hortaliça de alta perecividade, pode incorrer em perdas de até metade da produção na fase pós-colheita. Atualmente, a forma mais comumente utilizada para controle destes microrganismos está na aplicação de fungicidas sintéticos (agrotóxicos), porém, com o agravo de seu uso ser altamente prejudicial à saúde. Diante desse cenário, o controle biológico surge como uma alternativa limpa de controlar microrganismos indesejáveis, por meio da utilização de seus próprios inimigos naturais. Neste trabalho, propomos o controle de espécies fúngicas causadoras de doenças pós-colheita e deterioração de tomates, por meio da utilização de isolados bacterianos cultiváveis obtidos previamente a partir de rizosfera e raízes de Langsdorffia hypogaea, uma planta holoparasita obrigatória. Um total de 36 isolados foram diretamente confrontados com quatro espécies fúngicas bioprospectadas diretamente de tomates, nomeadas como F8", "F11", "F7.2" e "F12". Além disso, os isolados de melhor eficiência nesta etapa, foram posteriormente avaliados quanto a capacidade de autoagregação e produção de biofilme, características fundamentais para fixação em tecido vegetal. Deste total, 33 isolados foram capazes de inibir in vitro o crescimento de F8 com taxas de até 61,27%, enquanto que, para o fungo F11, os 36 isolados apresentaram taxas de inibição positiva, sendo a maior delas 76,81%. O fungo F7.2 se demonstrou o mais difícil de ser contido, 33 isolados bacterianos foram capazes de inibi-lo e a maior taxa alcançada foi 56,04%, entretanto, diferente dos demais, apenas um isolado bacteriano apresentou taxa de inibição superior a 50%. Finalmente, todos os 36 isolados bacterianos foram capazes de inibir o fungo F12 alcançando a maior faixa de inibição, com valores de até 93,83%. Dos 36 isolados testados, 14 melhores passaram para a próxima fase, dentre estes, 8 isolados foram capazes de se autoagregar com taxas baixas de até 20,1%. Os 14 isolados bacterianos, foram capazes de produzir biofilme, 7 deles se enquadraram como produtores moderados, enquanto os 7 demais foram classificados como fortes produtores. Concluímos que bactérias provenientes do solo do QF e da planta Langsdorffia hypogaea são potenciais agentes biocontroladores de fungos deterioradores, entretanto, serão necessários estudos mais aprofundados para verificar a atividade diretamente no fruto.Item Bioprospecção do potencial antagônico de bactérias do Quadrilátero Ferrífero a Colletotrichum lindemuthianum.(2020) Matos, Rosilene Cristina de; Moreira, Leandro Marcio; Moreira, Leandro Marcio; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Queiroz, Maria Vieira deO Quadrilátero Ferrífero (QF) por compreender ambientes únicos é considerado uma área de particular importância biológica, as bactérias associadas as raízes de plantas podem beneficia-las por meio de estímulo ao seu desenvolvimento, assim como na proteção à patógenos. Os fungos fitopatogênicos são responsáveis por grande parte das perdas na agricultura, destes, a fusariose ocasionada pelo fungo Fusarium oxysporum e antracnose causada pelo fungo fitopatogênico Colletotrichum lindemuthianum, são doenças de relativa importância visto a severidade e o difícil controle que normalmente é realizado por meio de produtos químicos. Neste contexto, este estudo objetivou investigar o potencial antagônico e a de promoção de crescimento vegetal em plantas de Phaseolus vulgaris de bactérias extraídas de solos e plantas da região do Quadrilátero Ferrífero contra o fungo causador da antracnose no feijoeiro Colletotrichum lindemuthianum. Para isso, 62 isolados bacterianos obtidos a partir de uma coleção existente no Laboratório de Interação Bactéria Ambiente – LabGiba da Universidade Federal de Ouro Preto, tiveram sua atividade antagônica avaliada inicialmente contra o fungo Fusarium oxysporum, e em seguida confrontados contra o fungo alvo desse estudo, Colletotrichum lindemuthianum cepa C89 (CICL89). Os 18 isolados que apresentaram potencial de inibição entre 20, 25% e acima de 50% para Fusarium foram avaliados quanto á sua atividade antagônica contra CICL89 por meio dos ensaios de inibição direta, indireta por compostos voláteis, indireta por compostos não voláteis difusíveis e ensaio de termoestabilidade dos isolados. Os cinco isolados que obtiveram taxa de inibição acima de 67% foram selecionados para os ensaios de promoção de crescimento vegetal, essencialmente, capacidade de solubilizar fosfato, positiva para 3 isolados, e produzir sideróforos, positivo para 2 isolados. Em seguida procedeu o ensaio em casa de vegetação para verificar o potencial in vivo, porém, devido a condições de padronização desfavoráveis os resultados obtidos não puderam ser conclusivos. Dos cinco isolados de interesse, quatro foram identificados como sendo dos gêneros: Pantoea e Acinetobacter, o isolado LR1 será sequenciado posteriormente para correta identificação. Constatou-se assim que isolados ambientais de um geossistema pouco estudado podem ser eficientes controladores do crescimento de C. lindemuthianum in vitro, permitindo estabelecer uma prova de conceito para ensaios de controle biológico deste fitopatógeno em campo.Item Prospecção do potencial anti fúngico de isolados bacterianos obtidos a partir da epiderme de anuros do Quadrilátero ferrífero - MG.(2020) Fernandes, Camila Henriques de Paula; Moreira, Leandro Marcio; Sanchez, Angelica Bianchini; Cordeiro, Isabella Ferreira; Moreira, Leandro Marcio; Oliveira Júnior, Ênio Nazaré de; Cruz, Izinara Rosse daO controle biológico utilizando bactérias como antagonistas é uma maneira eficiente para o controle de pragas causadas por fungos. Neste cenário, o objetivo geral deste trabalho foi prospectar o potencial antifúngico de isolados bacterianos cultiváveis obtidos a partir da pele de quatro espécies de anuros coletados na EET. A Estação Ecológica do Tripuí (EET) está localizada no Quadrilátero Ferrífero, Ouro Preto, MG. Esta área possui alta biodiversidade, com destaque para a anurofauna. Assim, 192 isolados bacterianos obtidos a partir da pele das espécies Boana albopunctata, Boana faber, Rhinella crucifer e Ischnocnema izecksohni foram investigadas quanto à capacidade de atuarem como biocontroladores de Fusarium oxysporum e Colletotrichum lindemuthianum, respectivos agentes causais da fusariose e da antracnose, que acometem várias culturas agrícolas, acarretando diversos prejuízos econômicos e sociais. Para o ensaio inicial, os 192 isolados foram avaliados contra F. oxysporum, por meio de ensaio de inibição direta. Dentre os isolados analisados, 15 foram capazes de inibir em até 60% do crescimento do fungo. Estes 15 isolados foram então selecionados para o ensaio de inibição direta contra o C. lindemuthianum, seguindo o mesmo protocolo. Oito apresentaram taxa de inibição superior a 80%, dentre eles, dois com inibição de 100% do crescimento. Esses 8 isolados foram então avaliados quanto a capacidade de inibição indireta por compostos difusíveis e termoestáveis, os quais apresentaram resultados equivalentes aos testes anteriores. Porém, nenhum foi capaz de inibir por meio da produção de compostos voláteis. Além disso, foram realizados ensaios de produção de amilase, protease e celulase para estes 8 isolados, dos quais 6 apresentaram resultado positivo para todas as enzimas avaliadas. Os isolados também apresentaram resultados positivos para a produção de biofilme, auto-agregação, fixação de nitrogênio e solubilização de fosfato. Finalmente, os 8 isolados foram identificados por sequenciamento da subunidade 16S do gene ribossomal. Desta forma, conclui-se que estes isolados bacterianos apresentam potencial antagônico até então desconhecido com características fisiológicas que os apontam como potenciais agentes biocontroladores contra fungos de importância agrícola.