Navegando por Autor "Rosa, Carlos Augusto"
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Item Análise poligênica da tolerância ao alumínio em Saccharomyces cerevisiae por mapeamento de QTL.(2018) Mezadri, Hygor; Brandão, Rogélio Lopes; Thevelein, Johan; Dumortier, Françoise; Brandão, Rogélio Lopes; Rosa, Carlos Augusto; Tótola, Marcos Rogério; Cota, Renata Guerra de Sá; Freitas, Renata Nascimento deO bioetanol é um produto de grande importância econômica, principalmente devido a sua utilização como combustível renovável. A levedura Saccharomyces cerevisiae utiliza a sacarose obtida da cana-de-açúcar para produzir bioetanol por fermentação. Alguns fatores diminuem a capacidade fermentativa dessa levedura, por exemplo, a presença de Al3+ no caldo de cana-de-açúcar, levando a um aumento do tempo de fermentação e menor produção de bioetanol. Este trabalho teve como objetivo realizar a análise poligênica da tolerância ao alumínio em Saccharomyces cerevisiae utilizando a técnica de mapeamento de QTLs (Quantitative Trait Locus). Uma triagem entre 840 estirpes de leveduras isoladas de diferentes ambientes foi feita a fim de selecionar uma altamente tolerante ao alumínio. Dentre as estirpes testadas, a levedura denominada Bruggeman Fresh apresentou crescimento e melhor desempenho fermentativo em presença de 5 mM de Al2(SO4)3. A estirpe PE-2, amplamente utilizada na produção de etanol pela indústria brasileira, apresentou uma maior sensibilidade ao alumínio. Estas duas leveduras, Bruggeman Fresh e PE-2, foram escolhidas para a estratégia de análise poligênica para o fenótipo de resistência ao alumínio adotada neste estudo. Após esporulação e dissecação das tétrades, os parentais superior e inferior foram selecionados e cruzados dando origem ao híbrido diploide. Foi realizado um pré-teste em meio sólido contendo alumínio com 658 segregantes obtidos a partir desse híbrido diploide, sendo que 150 segregantes foram selecionados e submetidos ao teste fermentativo. A partir do teste da performance fermentativa em presença de Al2(SO4)3, 30 segregantes foram selecionados como fenótipo superior (alta tolerância ao alumínio). Foi realizada a extração do DNA genômico desses 30 segregantes agrupados e 120 segregantes não selecionados (agrupados randomicamente), assim como das estirpes parentais superior e inferior e sequenciadas. A partir das análises das sequências e mapeamento de QTL foi encontrada uma região no cromossomo VI com grande ligação ao fenótipo de interesse, observado devido à diferença na frequência dos SNPs entre os grupos selecionado e não selecionado. Após a análise de reciprocidade hemizigótica, foi identificado que o gene FAB1 tem um importante papel sobre a tolerância ao alumínio em S. cerevisiae.Item Bioprospecção de metabólitos bioativos produzidos por fungos endofíticos associados a angiospermas presentes na Antártica.(Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto., 2011) Santiago, Iara Furtado; Rosa, Luiz Henrique; Rosa, Carlos AugustoApesar das relações ecológicas, evolutiva e do potencial biotecnológico de muitos microrganismos, pouco se conhece da micota presente no continente Antártico. Desta forma, este trabalho teve como objetivo detectar a presença de metabólitos bioativos produzidas por fungos endofíticos associados as angiospermas antárticas Deschampsia antarctica Desv. (Poaceae) e Colobanthus quitensis quitensis (Kunth) Bartl. (Caryophyllaceae). Dos 564 isolados de fungos endofíticos, 251 foram obtidos de C. quitensis e 313 de D. antarctica. Estes fungos foram cultivados em Agar Batata Dextrosado por 15 dias a 15°C para obtenção dos extratos brutos. Os 477 extratos obtidos foram avaliados quanto a proliferação celular das linhagens de células tumorais humanas MCF-7 (glândula mamária), UACC-62 (melanoma) e TK-10 (renal); e de formas amastigota de Leishmania amazonensis e Trypanosoma cruzi. Após a triagem, seis extratos foram ativos sobre a proliferação de pelo menos uma das linhagens de células tumorais. Destes, quatro extratos apresentaram inibição sobre MCF-7, um sobre TK-10 e um sobre UACC-62. Nenhum extrato foi ativo para duas ou mais linhagens de células tumorais, sugerindo uma seletividade dos extratos testados. Vinte sete extratos obtidos de fungos associados a D. antarctica foram ativos contra L. amazonensis. Nenhum extrato foi capaz de inibir o crescimento de T. cruzi. Todos os isolados ativos foram identificados por meio do sequenciamento da região espaçadora transcrita interna (ITS) do gene do rRNA. Os seguintes gêneros foram identificados: Alternaria, Cadophora, Helgardia, Microdochium, Phaeosphaeria, Oculimacula e Ypsilina. Os extratos de dois isolados de Microdochium phragmitis (UFMGCB 2479 e UFMGCB 2656) apresentaram os menores valores de CI50 (8 e 12,5 μg/mL, respectivamente) sobre as linhagens de células tumorais. Os extratos dos táxons UFMGCB 2672 (não identificado) e Phaeosphaeria sp. UFMGCB 2669 foram ativos sobre L. amazonensis com valores de CI50 de 0,2 e 0,4 μg/mL, respectivamente. Os resultados obtidos neste estudo contribuem para o conhecimento do potencial biotecnológico da micota endofítica associadas a plantas endêmicas do ecossistema antártico. Estes fungos podem representar uma fonte promissora de metabólitos protótipos para o desenvolvimento de novas drogas, em especial contra doenças negligenciadas.Item Brazilian microbiome project : revealing the unexplored microbial diversity-challenges and prospects.(2014) Pylro, Victor Satler; Roesch, Luiz Fernando Wurdig; Ortega, José Miguel; Amaral, Alexandre Morais do; Tótola, Marcos Rogério; Hirsch, Penny Ruth; Rosado, Alexandre Soares; Góes Neto, Aristóteles; Silva, Artur Luiz da Costa da; Rosa, Carlos Augusto; Morais, Daniel Kumazawa; Andreote, Fernando Dini; Duarte, Gabriela Frois; Melo, Itamar Soares de; Seldin, Lucy; Lambais, Márcio Rodrigues; Hungria, Mariangela; Peixoto, Raquel Silva; Kruger, Ricardo Henrique; Tsai, Siu Mui; Azevedo, Vasco Ariston de CarvalhoThe Brazilian Microbiome Project (BMP) aims to assemble a Brazilian Metagenomic Consortium/Database. At present, many metagenomic projects underway in Brazil are widely known. Our goal in this initiative is to co-ordinate and standardize these together with new projects to come. It is estimated that Brazil hosts approximately 20 % of the entire world’s macroorganism biological diversity. It is 1 of the 17 countries that share nearly 70 % of the world’s catalogued animal and plant species, and is recognized as one of the most megadiverse countries. At the end of 2012, Brazil has joined GBIF (Global Biodiversity Information Facility), as associated member, to improve the access to the Brazilian biodiversity data in a free and open way. This was an important step toward increasing international collaboration and clearly shows the commitment of the Brazilian government in directing national policies toward sustainable development. Despite its importance, the Brazilian microbial diversity is still considered to be largely unknown, and it is clear that to maintain ecosystem dynamics and to sustainably manage land use, it is crucial to understand the biological and functional diversity of the system. This is the first attempt to collect and collate information about Brazilian microbial genetic and functional diversity in a systematic and holistic manner. The success of the BMP depends on a massive collaborative effort of both the Brazilian and international scientific communities, and therefore, we invite all colleagues to participate in this project.Item Cerebral macroabscess caused by Candida albicans in an immunocompetent patient : a diagnostic challenge.(2014) Figueiredo, Sônia Maria de; Campolina, Sabrina Sidney; Rosa, Carlos Augusto; Gontijo, Marcus; Tirone, Thelma; Assunção, Cláudia Barbosa; Freire, Tarcísio F. A.; Christo, Paulo PereiraWe describe the history of a 24-year-old immunocompetent man with an expansive lesion in the brain stem that, after many misdiagnoses, was found to be caused by a Candida albicans abscess. One year after surgery and 3 months of fluconazole treatment, the patient was asymptomatic and all image and laboratory tests were normal.Item Effect of the trehalose levels on the screening of yeast as probiotic by in vivo and in vitro assays.(2008) Martins, Flaviano dos Santos; Castro, Ieso de Miranda; Rosa, Carlos Augusto; Nicoli, Jacques Robert; Neves, Maria JoséProbiotics are viable defined microorganisms (bacteria or yeasts) that exert a beneficial effect on the health of the host when ingested in adequate amounts. Screening for such biotherapeutic agents is commonly performed by in vitro assays simulating gastrointestinal environment to determine the ability to survive in the digestive tract. In the present study, the possibility of extrapolation of data obtained in in vitro assays to in vivo conditions was studied using five Saccharomyces cerevisiae strains isolated from Brazilian Atlantic rain forest. Trehalose contents and survival after exposure to a combination of physiological stresses generally found in the gastrointestinal tract of humans were determined for the five yeasts and compared to the behavior of Saccharomyces boulardii, a well-known probiotic. The results were completed with the colonization capacity of the gastrointestinal tract of gnotobiotic mice by these yeast strains. Some results obtained by in vitro assays are not confirmed by in vivo experiments, indicating that the extrapolation cannot be always done.Item Starmerella neotropicalis f. a., sp. nov., a yeast species found in bees and pollen.(2013) Daniel, Heide Marie; Rosa, Carlos Augusto; Calaça, Paula de Souza São Thiago; Itabaiana, Yasmine Antonini; Bastos, Esther Margarida Alves Ferreira; Evrard, Pierre; Huret, Stéphanie; Jiménez, Abel Fidalgo; Lachance, Marc AndréA novel yeast species was found repeatedly and in high cell densities in underground-nesting stingless bees of the species Melipona quinquefasciata and their provisions in northern Minas Gerais (Brazil). One additional strain was isolated from bee-collected pollen in Cuba. Phylogenetic analyses based on rRNA gene sequences (D1/D2 large subunit gene and internal transcribed spacer) indicated that the novel species belongs to the Starmerella clade and is most closely related to Candida (iter. nom. Starmerella) apicola. Growth reactions on carbon and nitrogen sources were typical of those observed in related species of the Starmerella clade. PCRfingerprinting with mini- and microsatellite specific primers allowed the distinction of the novel species from Candida apicola, Candida bombi and a yet undescribed species represented by strain CBS 4353. On the basis of phylogenetic relationships, the novel species is assigned to the genus Starmerella despite the failure to observe sexual reproduction after extensive mating tests. We propose the name Starmerella neotropicalis f. a., sp. nov.