Navegando por Autor "Ribeiro, Erica Milena de Castro"
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Item Aqueous extract of Baccharis trimera improves redox status and decreases the severity of alcoholic hepatotoxicity.(2017) Rabelo, Ana Carolina Silveira; Araújo, Glaucy Rodrigues de; Lúcio, Karine de Pádua; Araújo, Carolina Morais; Miranda, Pedro Henrique de Amorim; Silva, Breno de Mello; Carneiro, Ana Cláudia Alvarenga; Ribeiro, Erica Milena de Castro; Lima, Wanderson Geraldo de; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Brandão, Geraldo Célio; Costa, Daniela CaldeiraThe metabolism of ethanol occurs mainly in the liver, promoting increase of reactive oxygen species and nitrogen, leading to redox imbalance. Therefore, antioxidants can be seen as an alternative to reestablish the oxidizing/reducing equilibrium. The aim of this study was to evaluate the antioxidant and hepatoprotective effect of aqueous extract of Baccharis trimera (Less.) DC., Asteraceae, in a model of hepatotoxicity induced by ethanol. The extract was characterized and in vitro tests were conducted in HepG2 cells. It was evaluated the cells viability exposed to aqueous extract for 24 h, ability to scavenging the radical DPPH, besides the production of reactive oxygen species and nitric oxide, and the influence on the transcriptional activity of transcription factor Nrf2 (12 and 24 h) after exposure to 200 mM ethanol. The results showed that aqueous extract was non-cytotoxic in any concentration tested; moreover, it was observed a decrease in ROS and NO production, also promoting the transcriptional activity of Nrf2. In vivo, we pretreatment male rats Fisher with 600 mg/kg of aqueous extract and 1 h later 5 ml/kg of absolute ethanol was administrated. After two days of treatment, the animals were euthanized and lipid profile, hepatic and renal functions, antioxidant status and oxidative damage were evaluated. The treatment with extract improved liver function and lipid profile, reflecting the reduction of lipid microvesicules in the liver. It also promoted an increase of glutathione peroxidase activity, decrease of oxidative damage and MMP2 activity. These results, analyzed together, suggest the hepatoprotective effect of B. trimera aqueous extract.Item Baccharis trimera protects against ethanol induced hepatotoxicity in vitro and in vivo.(2018) Rabelo, Ana Carolina Silveira; Lúcio, Karine de Pádua; Araújo, Carolina Morais; Araújo, Glaucy Rodrigues de; Miranda, Pedro Henrique de Amorim; Carneiro, Ana Cláudia Alvarenga; Ribeiro, Erica Milena de Castro; Silva, Breno de Mello; Lima, Wanderson Geraldo de; Costa, Daniela CaldeiraEthnopharmacological relevance: Baccharis trimera has been traditionally used in Brazil to treat liver diseases. Aim of the study: To evaluate the protective effect of Baccharis trimera in an ethanol induced hepatotoxicity model. Materials and methods: The antioxidant capacity was evaluated in vitro by the ability to scavenged the DPPH radical, by the quantification of ROS, NO and the transcription factor Nrf2. Hepatotoxicity was induced in animals by administration of absolute ethanol for 2 days (acute) or with ethanol diluted for 28 days (chronic). The biochemical parameters of hepatic function (ALT and AST), renal function (urea and creatinine) and lipid profile (total cholesterol, triglycerides and HDL) were evaluated. In addition to antioxidant defense (SOD, catalase, glutathione), oxidative damage markers (TBARS and carbonylated protein), MMP-2 activity and liver histology. Results: Baccharis trimera promoted a decrease in ROS and NO, and at low concentrations promoted increased transcription of Nrf2. In the acute experiment it promoted increase of HDL, in the activity of SOD and GPx, besides diminishing TBARS and microesteatosis. Already in the chronic experiment B. trimera improved the hepatic and renal profile, decreased triglycerides and MMP-2 activity, in addition to diminishing microesteatosis. Conclusion: We believe that B. trimera action is possibly more associated with direct neutralizing effects or inhibition of reactive species production pathways rather than the modulation of the antioxidant enzymes activity. Thus it is possible to infer that the biological effects triggered by adaptive responses are complex and multifactorial depending on the dose, the time and the compounds used.Item Current strategies for diagnosis of paracoccidioidomycosis and prospects of methods based on gold nanoparticles.(2016) Ferreira, Cyntia Silva; Ribeiro, Erica Milena de Castro; Goes, Alfredo de Miranda; Silva, Breno de MelloParacoccidioidomycosis (PCM) is a human systemic granulomatous mycosis caused by thermodimorphic fungi from Paracoccidioides genus. The disease is prevalent in Latin America and triggers a serious clinical condition. Consequently, rapid diagnosis and treatment are crucial to prevent progression of the disease, which can result in death. Currently, there are several established methods for PCM diagnosis. However, many of these tests still present challenges in terms of cost, accessibility and efficiency. In this scenario, gold nanoparticles represent a promising alternative since they have particular optical and electronic properties, which allow its use for biomolecules detection. This review will briefly present techniques available for PCM diagnosis and the perspectives of implementation of gold nanoparticles for diagnosis of this mycosis.Item Curso de verão em biotecnologia : um relato da experiência na Universidade Federal de Ouro Preto.(2022) Ferreira, Cyntia Silva; Ribeiro, Erica Milena de Castro; Carneiro, Simone Pinto; Silva, Fábio Augusto Rodrigues e; Silva, Breno de MelloEste trabalho tem como objetivo relatar as experiências das três primeiras edições do Curso de Verão em Biotecnologia da Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP), que foram integralmente desenvolvidas pelos alunos da pós-graduação. Esse Curso surgiu da necessidade de dar mais visibilidade às pesquisas realizadas na universidade, configurando uma proposta de educação científica. Assim, ele foi estruturado para proporcionar aos participantes uma oportunidade de interação com o ambiente de pesquisa da UFOP, por meio de estágios em laboratórios, minicursos e palestras. Essas atividades ilustraram os conceitos fundamentais da Biotecnologia, bem como as formas de sua inserção na sociedade, contribuindo para a capacitação profissional dos graduandos. Para os alunos da pós-graduação, responsáveis pela organização, os Cursos proporcionaram um maior entendimento acerca da estruturação física e organizacional do programa de pós-graduação no qual estão inseridos. Além disso, trouxeram para eles a oportunidade de praticar atividades de docência e de divulgação científica durante as palestras e os cursos práticos.Item Curso de verão em biotecnologia : um relato da experiência na Universidade Federal de Ouro Preto.(2022) Ferreira, Cyntia Silva; Ribeiro, Erica Milena de Castro; Carneiro, Simone Pinto; Silva, Fábio Augusto Rodrigues e; Silva, Breno de MelloEste trabalho tem como objetivo relatar as experiências das três primeiras edições do Curso de Verão em Biotecnologia da Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP), que foram integralmente desenvolvidas pelos alunos da pós-graduação. Esse Curso surgiu da necessidade de dar mais visibilidade às pesquisas realizadas na universidade, configurando uma proposta de educação científica. Assim, ele foi estruturado para proporcionar aos participantes uma oportunidade de interação com o ambiente de pesquisa da UFOP, por meio de estágios em laboratórios, minicursos e palestras. Essas atividades ilustraram os conceitos fundamentais da Biotecnologia, bem como as formas de sua inserção na sociedade, contribuindo para a capacitação profissional dos graduandos. Para os alunos da pós-graduação, responsáveis pela organização, os Cursos proporcionaram um maior entendimento acerca da estruturação física e organizacional do programa de pós-graduação no qual estão inseridos. Além disso, trouxeram para eles a oportunidade de praticar atividades de docência e de divulgação científica durante as palestras e os cursos práticos.Item Desenvolvimento de biossensor para detecção direta de Flavivirus utilizando nanobastões de ouro.(2019) Ribeiro, Erica Milena de Castro; Silva, Breno de Mello; Silva, Breno de Mello; Tótola, Antônio Helvécio; Figueiredo, Rute Cunha; Paula, Sérgio Oliveira de; Mosqueira, Vanessa Carla FurtadoA co-circulação de Dengue virus, Zika virus, Yellow fever virus, Chikungunia virus e Mayaro virus tem causado grande impacto na saúde pública brasileira e mundial. Os programas de controle e prevenção de arboviroses e estudos epidemiológicos poderiam ser muito beneficiados e aperfeiçoados com a utilização de metodologias de detecção direta dos vírus em mosquitos, pois possibilitaria uma vigilância mais precisa nas populações de vetores ao longo do tempo. Porém, os métodos de diagnósticos hoje disponíveis, apesar de possuírem alta sensibilidade e especificidade são, em sua maioria, onerosos, demandam treinamento específico para aplicação e interpretação e não provem um diagnóstico rápido. Neste contexto, o desenvolvimento de novas tecnologias de biossensores que apresentem benefícios quanto ao tempo de análise, sensibilidade e simplicidade de manipulação têm sido objeto de pesquisa nas esferas pública e privada. A partir deste fato, este trabalho propõe desenvolver e analisar a eficácia de metodologias de funcionalização de nanobastões de ouro (NBs) com anticorpos específicos anti-DENV2 e anti-flavivirus para testar a capacidade de detecção de ligação anticorpo-partícula viral. A detecção de biomoléculas ligadas às nanopartículas de ouro (AuNPs), tais como proteínas e anticorpos, pode ser feita a partir da análise do seu espectro de absorção. Para isso, nanobastões de ouro foram sintetizados, funcionalizados a 4 mM de polietilenoimina, conjugados a 0,4 μg/mL de anticorpos e incubados com 103 UFP/mL de vírus. Os dados foram obtidos através da leitura da ressonância plasmônica de superfície localizada em espectrômetro de varredura UV-Vis. A síntese dos nanobastões, que utilizou o método de crescimento com sementes com a utilização de diferentes agentes redutores, mostrou-se reprodutível. Além disso, um deslocamento muito expressivo no pico de absorção foi observado quando biossensores contendo anti-flavivirus foram incubados em solução com DENV2 e ZIKV, mas não foi observado após incubação com MAYV, um Alphavirus utilizado como controle negativo. Como esperado, nos biossensores contendo anti-DENV2 o deslocamento foi observado apenas na presença de DENV2, demonstrando a especificidade dos anticorpos utilizados. Na presença de soro humano diluído 1:3200 e macerado de mosquito diluído 8x, contendo DENV2 ou ZIKV, o limite de detecção estimado foi de 100 UFP/mL. Assim, sugere-se que os nanobastões de ouro apresentam potencial para o desenvolvimento de novas metodologias de diagnóstico mais rápidos, precisos e práticos que as técnicas já existentes e viabilizar estudos de vigilância da virologia em mosquitos.Item Desenvolvimento de sistema de diagnóstico de dengue utilizando nanopartículas de ouro.(2015) Ribeiro, Erica Milena de Castro; Silva, Breno de Mello; Santos, Orlando David Henrique dos; Resende, Rodrigo RibeiroA Dengue é transmitida pelo mosquito Aedes Aegypti e é causada pelo Dengue vírus da família Flaviviridae. É conhecida como a arbovirose mais importante da atualidade, colocando aproximadamente metade da população mundial em áreas de risco iminente de transmissão. A ausência de vacinas eficazes e tratamentos específicos pra Dengue tornam necessário um diagnóstico precoce e preciso para esta doença, possibilitando assim, a clínica adequada e oportunas intervenções para prevenir a morbidade grave e a mortalidade. Neste contexto, novos materiais com propriedades químicas e físicas peculiares, tais como nanopartículas de ouro (AuNPs) têm sido utilizadas como biomarcadores. Estas nanopartículas têm propriedades físico-químicas únicas, tal como a oscilação coletiva dos elétrons chamada de ressonância plasmônica, que podem ser facilmente ajustadas. Assim, a detecção de biomoléculas como proteínas e anticorpos ligados às AuNPs pode ser feita a partir do seu espectro de absorção. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi desenvolver e analisar a eficácia de metodologias de funcionalização de nanopartículas com anticorpos específicos anti-DENV e anti-flavivirus e a ligação dos mesmos aos antígenos. Para isso, imunoglobulinas foram purificadas por coluna de afinidade e, inicialmente, as nanopartículas de ouro (AuNPs) foram testadas para determinação da melhor concentração de uso dos reagentes: cisteamina (0,5mM) e polietilenoimina (0,3%) e de anticorpos (0,4μg/ml) a serem utilizados. Os resultados foram analisados através da leitura de sua ressonância de plasmon em espectrômetro de varredura UV-Vis e um deslocamento no comprimento de onda foi observado a cada funcionalização, se comparado com AuNPs não funcionalizados e caracterizados anteriormente. Quando as AuNPs foram incubadas em solução com Dengue virus foi possível observar um forte deslocamento nos primeiros minutos de contato. Mas quando incubados com Mayaro virus (Alfavirus) o deslocamento foi observado apenas na presença de alta concentração do vírus, que não é encontrada em amostras naturais, demonstrando a especificidade dos anticorpos utilizados. Assim, sugere-se que as nanopartículas de ouro podem ser utilizadas para um diagnóstico de baixo custo de produção e ser ainda mais rápido, preciso e prático que as técnicas já existentes.Item Detailed search for protein kinase(s) involved in plasma membrane H+-ATPase activity regulation of yeast cells.(2015) Pereira, Renata Rebeca; Castanheira, Diogo Dias; Teixeira, Janaina Aparecida; Bouillet, Leoneide Érica Maduro; Ribeiro, Erica Milena de Castro; Trópia, Maria José Magalhães; Alvarez, Florencia; Correa, Lygia Fátima da Mata; Mota, Bruno Eduardo Fernandes; Conceição, Luís Eduardo Fernandes Rodrigues da; Castro, Ieso de Miranda; Brandão, Rogélio LopesThis study displays a screening using yeast strains deficient in protein kinases known to exist in Saccharomyces cerevisiae. From 95 viable single mutants, 20 mutants appear to be affected in the glucose-induced extracellular acidification. The mutants that are unaffected in calcium signaling were tested for their sensitivity to hygromycin B. Furthermore, we verified whether the remaining mutants produced enzymes that are appropriately incorporated at plasma membrane. Finally, we measure the kinetic properties of the enzyme in purified plasma membranes from glucose-starved as well as glucose-fermenting cells. We confirmed the kinase Ptk2 involvement in H+−ATPase regulation (increase of affinity for ATP). However, the identification of the kinase(s) responsible for phosphorylation that leads to an increase in Vmax appears to be more complex. Complementary experiments were performed to check how those protein kinases could be related to the control of the plasma membrane H+−ATPase and/or the potential membrane. In summary, our results did not permit us to identify the protein kinase(s) involved in regulating the catalytic efficiency of the plasma membrane H+−ATPase. Therefore, our results indicate that the current regulatory model based on the phosphorylation of two different sites located in the C-terminus tail of the enzyme could be inappropriate.Item The involvement of calcium carriers and of the vacuole in the glucose-induced calcium signaling and activation of the plasma membrane H+-ATPase in Saccharomyces cerevisiae cells.(2012) Bouillet, Leoneide Érica Maduro; Cardoso, Anamaria de Souza; Perovano, Eduardo; Pereira, R. R.; Ribeiro, Erica Milena de Castro; Trópia, Maria José Magalhães; Fietto, Luciano Gomes; Tisi, Renata; Martegani, Enzo; Castro, Ieso de Miranda; Brandão, Rogélio LopesPrevious work from our laboratories demonstrated that the sugar-induced activation of plasma membrane H+-ATPase in Saccharomyces cerevisiae is dependent on calcium metabolism with the contribution of calcium influx from external medium. Our results demonstrate that a glucose-induced calcium (GIC) transporter, a new and still unidentified calcium carrier, sensitive to nifedipine and gadolinium and activated by glucose addition, seems to be partially involved in the glucose-induced activation of the plasma membrane H+-ATPase. On the other hand, the importance of calcium carriers that can release calcium from internal stores was analyzed in glucose-induced calcium signaling and activation of plasma membrane H+-ATPase, in experimental conditions presenting very low external calcium concentrations. Therefore the aim was also to investigate how the vacuole, through the participation of both Ca2+-ATPase Pmc1 and the TRP homologue calcium channel Yvc1 (respectively, encoded by the genes PMC1 and YVC1) contributes to control the intracellular calcium availability and the plasma membrane H+-ATPase activation in response to glucose. In strains presenting a single deletion in YVC1 gene or a double deletion in YVC1 and PMC1 genes, both glucose-induced calcium signaling and activation of the H+-ATPase are nearly abolished. These results suggest that Yvc1 calcium channel is an important component of this signal transduction pathway activated in response to glucose addition. We also found that by a still undefined mechanism Yvc1 activation seems to correlate with the changes in the intracellular level of IP3. Taken together, these data demonstrate that glucose addition to yeast cells exposed to low external calcium concentrations affects calcium uptake and the activity of the vacuolar calcium channel Yvc1, contributing to the occurrence of calcium signaling connected to plasma membrane H+-ATPase activation.Item Uso de nanobastões de ouro para o desenvolvimento de aulas práticas de nanotecnologia.(2017) Ferreira, Cyntia Silva; Ladeira, Luiz Orlando; Leite, Cristiano Fantini; Fonseca, Flávio Guimarães da; Ribeiro, Erica Milena de Castro; Versiani, Alice Freitas; Silva, Jorge Fernando de Souza; Magalhães, Cíntia Lopes de Brito; Silva, Breno de MelloUse of gold nanoparticles functionalization experiment was conducted in a biotechnology summer course at UFOP as a model for the introduction of the laboratory practice in nanotechnology for postgraduate courses in the areas of chemistry and biotechnology. The gold nanorods were synthesized by the seed method and then, functionalized with anti-IL-6 antibodies using the reagents EDAC/NHS and polyethyleneimine (PEI). This nanocompound was tested against the binding with the specific antigen (IL-6) and changes in the longitudinal plasmon absorption spectrum showed the coupling efficiency, which was also verified by the decrease in zeta potential. The experiment was satisfactory, with a positive feedback from participants, and could be implemented in nanotechnology practical classes from postgraduate courses, as a way for improve education in the emergent area of nanobiotechnology.