Navegando por Autor "Cabrera González, Marco Antonio"

Agora exibindo 1 - 3 de 3

Ensaio pré-clínico vacinal em hamsters para análise da imunogenicidade de uma nanoformulação contra a leishmaniose visceral.
(2016) Cabrera González, Marco Antonio; Giunchetti, Rodolfo Cordeiro; Mosqueira, Vanessa Carla Furtado; Mosqueira, Vanessa Carla Furtado; Rezende, Simone Aparecida; Araújo, Ricardo Nascimento
A leishmaniose visceral é causada pelo parasito Leishmania chagasi (sinonímia L. infantum) e tem como medidas de controle preconizada pelo Ministério da Saúde/Brasil a eutanásia do cão doente, principal reservatório do parasito. Diante do impacto social que este procedimento causa perante a sociedade, o desenvolvimento de uma vacina anti-LVC faz-se necessário e torna uma importante medida de controle da transmissão do parasito ao homem. Deste modo, o objetivo deste estudo foi avaliar o potencial de partículas submicrômicas do polímero ácido poli-D,L-láctico (PLA) e quitosana de baixo peso molecular, como carreadoras de antígenos vacinais contra leishmaniose visceral em modelo hamster. Neste contexto, foi realizado um ensaio pré-clínico vacinal com diferentes grupos experimentais, entre os quais: (i) Controle (solução salina estéril a 0,85%); (ii) Saponina (SAP; 100 μg/dose); (iii) Partícula Submicrométrica Pequena vazia (PSmP); (iv) Partícula Submicrométrica Grande vazia (PSmG); (v) Antígeno bruto de Leishmania amazonensis (LA); (v) Antígeno bruto L. amazonensis associado ao adjuvante saponina (LASAP); (vi) Partícula Submicrométrica Pequena contendo antígeno bruto de L. amazonensis (LAPSmP); e (vii) Partícula Submicrométrica Grande contendo antígeno bruto de L. amazonensis (LAPSmG). Dessa maneira, hamsters (Mesocricetus auratus) machos foram inoculados com três doses, por via subcutânea, em intervalo de 21 dias. O desafio experimental foi realizado com 107 promastigotas em fase estacionária de L. chagasi (cepa C46), após 30 dias da última dose. Nos tempos T0 (Antes da 1º dose), T3 (30 dias após o terceiro inóculo) e T180 (180 dias após desafio experimental com L. chagasi, e imediatamente antes da eutanásia), foram feitas coletas de sangue dos animais por punção cardíaca, para realização de teste de função hepática e renal, hemograma e análise dos níveis de IgG anti-Leishmania. Após a eutanásia dos animais, foram coletados baço e fígado para análise da carga parasitária pela técnica de diluição limitante. Os dados obtidos no presente trabalho mostraram que o emprego do polímero poli-D,L-láctico (PLA) de quitosana formulado em partículas submicrométricas associado ao antígeno bruto de L. amazonensis (formulações LAPSmP e LAPSmG) foram inócuos e seguros para administração em hamsters, além de serem imunogênicos e reduzirem drasticamente o parasitismo tecidual. Esta afirmação é baseada nos seguintes achados: (i) alterações locais e clínicas compatíveis com a manutenção dos animais; (ii) testes de função hepática e renal sem alterações; (iii) ausência de anemia e hemólise induzida durante o protocolo vacinal; (iv) indução de linfocitose após o término do protocolo vacinal, particularmente relacionada a formulação LAPSmG; (v) antigenicidade relacionada a produção de IgG total anti-Leishmania após o término do protocolo vacinal; (vi) redução do tamanho do baço, após o desafio experimental por L. chagasi, particularmente relacionada a formulação LAPSmG; (vii) redução da carga parasitária superior a 97% no baço e no fígado. Estes resultados indicam que o encapsulamento de antígeno bruto de Leishmania é uma estratégia que favorece o estabelecimento de imunogenicidade e a obtenção de elevados níveis de proteção contra a LV.
Nanoformulations with Leishmania braziliensis antigens triggered controlled parasite burden in vaccinated golden hamster (Mesocricetus auratus) against visceral leishmaniasis.
(2022) Ottino, Jennifer; Leite, Jaqueline Costa; Melo Júnior, Otoni Alves de Oliveira; Cabrera González, Marco Antonio; Carvalho, Tatiane Furtado de; Garcia, Giani Martins; Batista, Maurício Azevedo; Silveira, Patrícia; Cardoso, Mariana Santos; Bueno, Lilian Lacerda; Fujiwara, Ricardo Toshio; Santos, Renato Lima; Paes, Paulo Ricardo de Oliveira; Lemos, Denise da Silveira; Martins Filho, Olindo Assis; Galdino, Alexsandro Sobreira; Chávez Fumagalli, Miguel Angel; Dutra, Walderez Ornelas; Mosqueira, Vanessa Carla Furtado; Giunchetti, Rodolfo Cordeiro
Leishmaniasis is a widespread vector-borne disease in Brazil, with Leishmania (Leishmania) infantum as the primary etiological agent of visceral leishmaniasis (VL). Dogs are considered the main reservoir of this parasite, whose treatment in Brazil is restricted to the use of veterinary medicines, which do not promote a parasitological cure. Therefore, efficient vaccine development is the best approach to Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) control. With this in mind, this study used hamsters (Mesocricetus auratus) as an experimental model in an anti-Leishmania preclinical vaccine trial to evaluate the safety, antigenicity, humoral response, and effects on tissue parasite load. Two novel formulations of nanoparticles made from poly(D, L-lactic) acid (PLA) polymer loading Leishmania braziliensis crude antigen (LB) exhibiting two different particle sizes were utilized: LBPSmG (570 nm) and LBPSmP (388 nm). The results showed that the nanoparticles were safe and harmless to hamsters and were antigenic with the induction in LBSap, LBPSmG, and LBPSmG groups of total anti-Leishmania IgG antibodies 30 days after challenge, which persists 200 days in LBSap and LBPSmP. At the same time, a less pronounced hepatosplenomegaly in LBSap, LBPSmG, and LBPSmP was found when compared to control groups, as well as a less pronounced inflammatory infiltrate and granuloma formation in the spleen. Furthermore, significant reductions of 84%, 81%, and 90% were observed in spleen parasite burden accessed by qPCR in the LBSap, LBPSmG, and LBPSmP groups, respectively. In this way, LBSap, LBPSmG, and LBPSmP formulations showed better results in vaccinated and L. infantum-challenged animals in further reducing parasitic load in the spleen and attenuating lesions in liver and splenic tissues. This results in safe, harmless nanoformulation vaccines with significant immunogenic and infection control potential. In addition, animals vaccinated with LBPSmP had an overall reduction in parasite burden in the spleen, indicating that a smaller nanoparticle could be more efficient in targeting antigen-presenting cells.
Vaccination with formulation of nanoparticles loaded with Leishmania amazonensis antigens confers protection against experimental visceral leishmaniasis in hamster.
(2023) Cabrera González, Marco Antonio; Gonçalves, Ana Alice Maia; Ottino, Jennifer; Leite, Jaqueline Costa; Resende, Lucilene Aparecida; Melo Júnior, Otoni Alves de Oliveira; Silveira, Patricia; Cardoso, Mariana Santos; Fujiwara, Ricardo Toshio; Bueno, Lilian Lacerda; Santos, Renato Lima; Carvalho, Tatiane Furtado de; Garcia, Giani Martins; Paes, Paulo Ricardo de Oliveira; Galdino, Alexsandro Sobreira; Chávez Fumagalli, Miguel Angel; Melo, Marilia Martins; Lemos, Denise da Silveira; Martins Filho, Olindo Assis; Dutra, Walderez Ornelas; Mosqueira, Vanessa Carla Furtado; Giunchetti, Rodolfo Cordeiro
Visceral leishmaniasis (VL) is a fatal disease caused by the protozoa Leishmania infantum for which dogs are the main reservoirs. A vaccine against canine visceral leishmaniasis (CVL) could be an important tool in the control of human and CVL by reducing the infection pressure of L. infantum. Despite the CVL vaccine available on the market, the Brazilian Ministry of Health did not implement the use of it in their control programs. In this sense, there is an urgent need to develop more efficient vaccines. In this study, the association between two polymeric nanoformulations, (poly (D, L-lactic) acid (PLA) polymer) loading Leishmania amazonensis antigens, was evaluated as a potential immunobiological agent against VL using golden hamsters as an experimental model. The results indicated that no significant adverse reactions were observed in animals vaccinated with LAPSmP. LAPSmP presented similar levels of total anti-Leishmania IgG as compared to LAPSmG. The LAPSmP and LAPSmG groups showed an intense reduction in liver and spleen parasitic load by qPCR. The LAPSmP and LAPSmG vaccines showed exceptional results, indicating that they may be promising candidates as a VL vaccine.