Navegando por Autor "Béla, Samantha Ribeiro"

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Avaliação de quimeras como candidatos vacinais em modelo hamster (Mesocricetus auratus) desafiados por Leishmania infantum.
(2020) Gusmão, Miriã Rodrigues; Roatt, Bruno Mendes; Brito, Rory Cristiane Fortes de; Roatt, Bruno Mendes; Souza, Daniel Menezes; Béla, Samantha Ribeiro
A leishmaniose visceral é considerada a mais grave dentre as formas clínicas das leishmanioses e até o presente momento não há uma vacina que possa ser empregada em campanhas de controle e profilaxia dessa doença. No intuito de aprimorar estratégias para o desenvolvimento de vacinas, a vacinologia reversa, por meio da imunoinformática é uma moderna tecnologia que aborda metodologias computacionais para a busca de novos alvos e candidatos vacinais. Em um estudo prévio do nosso grupo de pesquisa, duas quimeras foram desenhadas empregando a estratégia da imunoinformática, Quimera A e Quimera B, e quando associadas ao adjuvante saponina, apresentaram resultados promissores em modelo murino. Entretanto, este modelo não reflete a evolução clínica observada em cães e humanos infectados pelo parasito. Neste sentido, é fundamental avaliar estes potenciais imunobiológicos em um modelo experimental que desenvolva de forma semelhante aspectos, clínicos-patológicos, imunológicos e parasitológicos observados em cães e humanos durante a progressão da LV. Desse modo, o objetivo deste trabalho foi avaliar a imunogenicidade e eficácia das quimeras isoladas e/ou associadas ao sistema de adjuvantes saponina e monofosforil lipídeo A (MPL) em modelo hamster (M. auratus) desafiados com L. infantum. Os animais foram divididos em seis grupos experimentais compreendendo: grupo salina (SAL), sitema de adjuvantes saponina e MPL (SM), quimera A (QA), quimera A associada a saponina+MPL (QASM), quimera B (QB) e quimera B associada a saponina+MPL (QBSM). Esses animais foram imunizados com três doses de cada uma das composições vacinais em intervalos de 15 dias entre as doses. Após 21 dias da última dose, os hamsters foram desafiados com promastigotas de L. infantum em fase estacionária de crescimento, pela via intraperitoneal e após 60 dias os animais foram necropsiados. Amostras de sangue, soro, fragmentos do baço foram obtidos para a realização de diferentes análises laboratoriais através de análises hematológicas, bioquímicas, imunológicas e parasitológicas. Em relação às análises hemato-bioquímicas, observamos que os grupos imunizados apresentaram parâmetros de leucograma, eritrograma e das funções renais, hepáticas e proteinograma normais. Entretanto, foram observadas nos grupos controle (SAL) e sistema de adjuvantes (SM) queda nos valores de plaquetas e alterações nas dosagens hepáticas, principalmente de ALT. A análise da resposta humoral pelo perfil de IgG-total anti-Leishmania, evidenciou uma redução na reatividade desse anticorpo nos grupos imunizados em relação aos grupos controles. Além disso, foi evidenciado nos grupos imunizados uma elevada resposta próinflamatória de esplenócitos com aumento da produção de citocinas como IFN- e TNF-, tanto por linfócitos totais e pela subpopulação CD4+ , bem como uma redução na produção da citocina IL-10 por estas células. As vacinas demonstraram eficácia constatada pela redução do parasitismo esplênico nos grupos imunizados chegando a mais de 90% de redução da carga parasitária o que pode estar relacionado também com a alta produção de óxido nítrico (NO) encontrada nesses grupos. Dessa forma, os resultados obtidos no presente trabalho sugerem o potencial de imunogenicidade e proteção das quimeras avaliadas, a relevância da utilização do hamster como modelo experimental para LV, bem como a importância de novas estratégias como a imunoinformática para o desenvolvimento de vacinas para a LV.
Efeito do polimorfismo biológico e molecular do Trypanosoma cruzi sobre a resposta imune e as alterações teciduais no coração e cólon de camundongos na fase crônica da infecção.
(2020) Duarte, Thays Helena Chaves; Vieira, Paula Melo de Abreu; Paiva, Nívia Carolina Nogueira de; Vieira, Paula Melo de Abreu; Paiva, Nívia Carolina Nogueira de; Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes; Béla, Samantha Ribeiro
Vários fatores atuam na patogênese da doença de Chagas (DCh), alguns são inerentes ao Trypanosoma cruzi, enquanto outros estão relacionados ao hospedeiro. Estudos demonstram uma associação entre o desenvolvimento de distintas formas clínicas e o tropismo tecidual de diferentes linhagens do T. cruzi, apontando o polimorfismo genético como fator crítico para o prognóstico da doença. Dados prévios do nosso grupo de pesquisa demonstraram que um isolado da cepa Berenice-78 (Be-78is) tem características histopatológicas semelhantes à cepa Be-62, bem como parasitemia semelhante à Be-78 parental, na fase aguda da DCh. Diante disso, esse trabalho teve como objetivo avaliar o efeito do polimorfismo biológico e molecular do T. cruzi sobre o processo inflamatório e as alterações da matriz extracelular no coração e cólon de camundongos ao longo da fase crônica da infecção experimental. Para isso 80 camundongos BALB/c foram divididos em quatro grupos experimentais: NI (não infectados), cepa Be-62, isolado Be-78is e cepa Be-78 parental, os animais foram eutanasiados aos 90 dias após a infecção (DAI). Os dados obtidos neste trabalho, mostram que os animais infectados pela cepa Be-78 parental mantiveram a carga parasitária no coração ao longo da infecção, se comparado aos dados da fase aguda (Nogueira-Paiva, 2015) no entanto, aos 90DAI, o processo inflamatório, exuberante na fase aguda foi capaz de gerar dano tecidual reparado com uma discreta fibrose, sugerindo na fase crônica recente, uma situação de equilíbrio entre parasito-hospedeiro, que pode estar relacionada à presença de amastigotas quiescentes, incapazes de gerar estímulo antigênico necessário à inflamação, portanto, “protegidas” do efeito citotóxico da resposta imune celular. Em contrapartida, os animais infectados pelo isolado Be-78is apresentavam um histotropismo preferencial para o cólon e uma resposta imune aparentemente controlada no coração, demonstraram, aos 90DAI, neste órgão, carga parasitária maior que a observada na fase aguda (Nogueira-Paiva, 2015) que embora, inferior em relação à cepa parental, acompanhada de processo inflamatório que foi importante no controle do parasitismo tecidual. Em detrimento do processo inflamatório sustentado na fase crônica, nenhuma alteração na expressão de laminina e conexina 43 foi observado nos animais infectados em relação os animais não infectados, o que pode estar relacionado ao aumento da citocina IL-10 encontrado nos animais infectados pelo isolado Be-78is que foi capaz de imunomodular o efeito citotóxico da resposta inflamatória. Assim, podemos concluir que no coração, o isolado Be-78is parece apresentar um perfil atrasado em relação à cepa Be-78 parental, podendo estar relacionado a uma patogenicidade inferior ou até mesmo por apresentar uma infecção mais silenciosa, sendo necessárias análises mais tardias que poderiam evidencia melhor as lesões causadas nos casos clínicos na DCh.
Inhalation of dimethyl fumarate-encapsulated solid lipid nanoparticles attenuate clinical signs of experimental autoimmune encephalomyelitis and pulmonary inflammatory dysfunction in mice.
(2022) Pinto, Bárbara Fernandes; Ribeiro, Lorena Natasha Brito; Silva, Gisela Bevilacqua Rolfsen Ferreira da; Freitas, Camila Simões de; Rocha, Lucas Kraemer; Oliveira, Fabrício Marcus Silva; Clímaco, Marianna Carvalho; Mourão, Flavio Afonso Gonçalves; Santos, Gabryella Soares Pinheiro dos; Béla, Samantha Ribeiro; Gurgel, Isabella Luísa da Silva; Leite, Fábio de Lima; Oliveira, Anselmo Gomes de; Vilela, Maura Regina Silva da Páscoa; Lima, Onésia Cristina Oliveira; Soriani, Frederico Marianetti; Fujiwara, Ricardo Toshio; Birbrair, Alexander; Russo, Remo de Castro; Tavares, Juliana Carvalho
Rationale: The FDA-approved Dimethyl Fumarate (DMF) as an oral drug for Multiple Sclerosis (MS) treatment based on its immunomodulatory activities. However, it also caused severe adverse effects mainly related to the gastrointestinal system. Objective: Investigated the potential effects of solid lipid nanoparticles (SLNs) containing DMF, administered by inhalation on the clinical signs, central nervous system (CNS) inflammatory response, and lung function changes in mice with experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE). Materials and methods: EAE was induced using MOG35–55 peptide in female C57BL/6J mice and the mice were treated via inhalation with DMF-encapsulated SLN (CTRL/SLN/DMF and EAE/SLN/DMF), empty SLN (CTRL/SLN and EAE/SLN), or saline solution (CTRL/saline and EAE/saline), every 72 h during 21 days. Results: After 21 days post-induction, EAE mice treated with DMF-loaded SLN, when compared with EAE/saline and EAE/SLN, showed decreased clinical score and weight loss, reduction in brain and spinal cord injury and inflammation, also related to the increased influx of Foxp3+ cells into the spinal cord and lung tissues. Moreover, our data revealed that EAE mice showed signs of respiratory disease, marked by increased vascular permeability, leukocyte influx, production of TNF-α and IL-17, perivascular and peribronchial inflammation, with pulmonary mechanical dysfunction associated with loss of respiratory volumes and elasticity, which DMF-encapsulated reverted in SLN nebulization. Conclusion: Our study suggests that inhalation of DMF-encapsulated SLN is an effective therapeutic protocol that reduces not only the CNS inflammatory process and disability progression, characteristic of EAE disease, but also protects mice from lung inflammation and pulmonary dysfunction.
Lesões cardíacas associadas à infecção oral pelo T. cruzi em camundongos.
(2020) Carvalho, Thaís Vieira de; Carneiro, Cláudia Martins; Vieira, Paula Melo de Abreu; Vieira, Paula Melo de Abreu; Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes; Lima, Wanderson Geraldo de; Béla, Samantha Ribeiro; Veloso, Vanja Maria
A via oral representa atualmente a principal forma de transmissão do T. cruzi no Brasil, especialmente na região Amazônica. Os surtos da doença de Chagas por essa via ocorrem em sua maioria pela contaminação de alimentos como o açaí e os indivíduos apresentam quadros graves com acometimento cardíaco. Além disso, altas taxas de mortalidade são registradas ainda na fase aguda da doença. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar as lesões cardíacas em camundongos infectados pela via oral e intraperitoneal com as cepas Be-78 e VL-10 do T. cruzi. Para isso, camundongos Swiss foram distribuídos em três grupos experimentais: controle não infectado (C); infectados pela via oral (VO) e infectados pela via intraperitoneal (VI). Os animais dos grupos VO e VI foram inoculados com 1x105 formas tripomastigotas metacíclicas das cepas Be-78 e VL-10 e eutanasiados nos dias 14, 21, 28, 35, 42 (fase aguda) e 180 (fase crônica) após a infecção para a cepa Be-78 e no dias 14, 21 e 28 (fase aguda) após a infecção para a cepa VL-10. Foram avaliadas a curva de parasitemia e a taxa de sobrevida durante todo o experimento. Além disso, foram coletados o sangue periférico para a obtenção do soro com o objetivo de analisar a atividade da isoenzima CKMB e o coração in totum para avaliar o parasitismo cardíaco, o processo inflamatório, a neoformação de colágeno e a expressão de fibronectina (FN). Na infecção com a cepa Be-78, o grupo VO apresentou pico máximo de parasitemia no 24° DAI e o grupo VI no 23º DAI. Em relação à infecção com a cepa VL-10, o grupo VO apresentou pico máximo de parasitemia no 22° DAI e o grupo VI no 21º DAI. Na infecção com a cepa Be-78, os animais do grupo VO apresentaram aumento significativo do parasitismo cardíaco no 21º DAI e no 21º e 28º DAI no grupo VI. Já na infecção com a cepa VL-10, o parasitismo cardíaco apresentou aumento significativo somente no grupo VI no 21º DAI. Em relação à atividade de CK-MB, somente os animais do grupo VO apresentaram aumento, sendo estes no 14º e 35º DAI na infecção com a cepa Be-78, enquanto que na infecção com a cepa VL-10 a dosagem da atividade de CK-MB foi maior no 14º e 21º DAI no grupo VO e no 21º DAI no grupo VI. Quanto ao processo inflamatório, na infecção com a cepa Be-78 observou-se aumento durante toda a fase aguda no grupo VO e no 35º e 42º DAI no grupo VI. Na infecção com a cepa VL10, o processo inflamatório no grupo VO também foi anterior, observado no 14º e 21º DAI e enquanto no grupo VI ocorreu somente no dia 21º DAI. Em relação ao reparo tecidual, foi detectado deposição de colágeno somente na infecção com a cepa VL-10, no 28º no grupo VI. A expressão de FN foi avaliada na fase aguda tardia (42º DAI) e na fase crônica (180º DAI) da infecção com a cepa Be-78, e somente o grupo VO apresentou aumento da expressão de FN no 42º DAI. Esses resultados indicam que a infecção pela via oral com as formas tripomastigotas metacíclicas das cepas Be-78 e VL-10 do T. cruzi resultaram em lesões cardíacas mais precoces e intensas na fase aguda em relação à via intraperitoneal.
Neuronal parasitism, early myenteric neurons depopulation and continuous axonal networking damage as underlying mechanisms of the experimental intestinal Chagas' disease.
(2020) Ricci, Mayra Fernanda; Béla, Samantha Ribeiro; Moraes, Michele Macedo; Bahia, Maria Terezinha; Mazzeti, Ana Lia; Oliveira, Anny Carolline Silva; Oliveira, Luciana Souza de; Radi, Rafael; Piacenza, Lucía; Arantes, Rosa Maria Esteves
There is a growing consensus that the balance between the persistence of infection and the host immune response is crucial for chronification of Chagas heart disease. Extrapolation for chagasic megacolon is hampered because research in humans and animal models that reproduce intestinal pathology is lacking. The parasite-host relationship and its consequence to the disease are not well-known. Our model describes the temporal changes in the mice intestine wall throughout the infection, parasitism, and the development of megacolon. It also presents the consequence of the infection of primary myenteric neurons in culture with Trypanosoma cruzi (T. cruzi). Oxidative neuronal damage, involving reactive nitrogen species induced by parasite infection and cytokine production, results in the denervation of the myenteric ganglia in the acute phase. The long-term inflammation induced by the parasite’s DNA causes intramuscular axonal damage, smooth muscle hypertrophy, and inconsistent innervation, affecting contractility. Acute phase neuronal loss may be irreversible. However, the dynamics of the damages revealed herein indicate that neuroprotection interventions in acute and chronic phases may help to eradicate the parasite and control the inflammatory-induced increase of the intestinal wall thickness and axonal loss. Our model is a powerful approach to integrate the acute and chronic events triggered by T. cruzi, leading to megacolon.
A potential role of cholinergic dysfunction on Impaired Colon Motility in experimental intestinal Chagas disease.
(2022) Ricci, Mayra Fernanda; Béla, Samantha Ribeiro; Barbosa, Joana Lobato; Moraes, Michele Macedo; Mazzeti, Ana Lia; Bahia, Maria Terezinha; Horta, Laila Sampaio; Santiago, Helton da Costa; Cruz, Jader dos Santos; Capettini, Luciano dos Santos Aggum; Arantes, Rosa Maria Esteves
Background/Aims Chagasic megacolon is caused by Trypanosoma cruzi, which promotes in several cases, irreversible segmental colonic dilation. This alteration is the major anatomic-clinical disorder, characterized by the enteric nervous system and muscle wall structural damage. Herein, we investigate how T. cruzi-induced progressive colonic structural changes modulate the colonic contractile pattern activity. Methods We developed a murine model of T. cruzi-infection that reproduced long-term modifications of the enlarged colon. We evaluated colonic and total intestinal transit time in animals. The patterns of motor response at several time intervals between the acute and chronic phases were evaluated using the organ bath assays. Enteric motor neurons were stimulated by electric field stimulation. The responses were analyzed in the presence of the nicotinic and muscarinic acetylcholine receptor antagonists. Western blot was performed to evaluate the expression of nicotinic and muscarinic receptors. The neurotransmitter expression was analyzed by real-time polymerase chain reaction. Results In the chronic phase of infection, there was decreased intestinal motility associated with decreased amplitude and rhythmicity of intestinal contractility. Pharmacological tests suggested a defective response mediated by acetylcholine receptors. The contractile response induced by acetylcholine was decreased by atropine in the acute phase while the lack of its action in the chronic phase was associated with tissue damage, and decreased expression of choline acetyltransferase, nicotinic subunits of acetylcholine receptors, and neurotransmitters. Conclusions T. cruzi-induced damage of smooth muscles was accompanied by motility disorders such as decreased intestinal peristalsis and cholinergic system response impairment. This study allows integration of the natural history of Chagasic megacolon motility disorders and opens new perspectives for the design of effective therapeutic.