Moraes, Karen Cristiane Martinez deSilva, Walmir da2014-12-092014-12-092013SILVA, W. da. Estabelecimento de um modelo celular para o estudo de hipertrofias cardíacas mediadas pela inflamação : o papel de peptídeos vasoativos na modulação de COX-2 e PTEN. 2013. 85 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) – Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2013.http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/4126Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.Trabalhos recentes têm demonstrado a importância do Sistema Renina-Angiotensina (SRA) na modulação das hipertrofias cardíacas e atenção especial vem sendo dada aos peptídeos vasoativos, Angiotensina II (Ang II) e a Angiotensina-(1-7) [Ang-(1-7)], devido aos seus efeitos antagônicos nas hipertrofias, além do envolvimento destes na modulação dos níveis da enzima ciclooxigenase-2 (COX-2), importante na produção de Prostaglandina E2 (PGE2), que direta ou indiretamente está envolvida com a resposta hipertrófica cardíaca quando mediada pela inflamação. Outro importante elemento no desenvolvimento do processo inflamatório crônico é a proteína supressora tumoral PTEN. Em tumores, onde a inflamação crônica esta presente, alguns estudos correlacionam a diminuição dos níveis de PTEN com a modulação da proteína COX-2, entretanto esta correlação ainda é obscura. Assim, no presente estudo, considerando-se um paralelismo molecular existente entre o processo inflamatório tumoral e os mecanismos hipertróficos/ inflamatórios cardíacos nós focamos nos processos de co-regulação de PTEN e COX-2 em cultura de células cardíacas tratadas com os peptídeos vasoativos Ang II e Ang-(1-7), visando a caracterização de marcadores moleculares e um futuro desenvolvimento de fármacos. Nossos resultados mostraram que as concentrações utilizadas dos peptídeos vasoativos não foram citotóxicas para o nosso modelo de estudo. Frente aos tratamentos, a análise da expressão gênica realizada através de reações de polimerização em cadeia (PCR) focou-se nos genes Cox-2, Pten, fatores transcricionais, marcadores de hipertrofia, assim como outros elementos correlacionados ao nosso modelo de estudo. Paralelamente, as análises proteícas por Western blot, demonstraram uma possível correlação entre COX-2 e PTEN quando da utilização do peptídeo Ang II. Baseado nessa observação, procuramos ainda analisar um possível mecanismo de regulação pós-transcricional, pela análise da expressão miRNAs nas culturas cardíacas estimuladas com a Ang II. Em conjunto os resultados deste trabalho demonstram que há um possível mecanismo de corregulação entre COX-2 e PTEN, além do possível envolvimento dos miR-26a e miR-26b na regulação dos níveis de PTEN, mostrando que o modelo celular estabelecido é funcional pra estudo das hipertrofias cardíacas mediado pela inflamação e colaborará com as etapas subsequentes na caracterização de marcadores moleculares como potenciais alvos terapêuticos.pt-BRDissertacao