Silva, Breno de MelloPineda Arrieta, Orlando Alfredo2023-11-132023-11-132023PINEDA ARRIETA, Orlando Alfredo. Ativação comparativa in vitro de vias sinalizadoras em resposta a infecção por Dengue 2, Zika e Febre amarela virus em células murinas. 2023. 77 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2023.http://www.repositorio.ufop.br/jspui/handle/123456789/17729Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.Os arbovírus são um conjunto de agentes infecciosos transmitidos por artrópodes, sendo os Flavivirus Dengue virus (DENV), Zika virus (ZIKV) e Yellow fever virus (YFV) um grande problema para a saúde pública. Na infecção celular por esses vírus, a ativação de vias de sinalização e a transdução de sinais desempenham funções essenciais na patogênese e fisiopatologia da doença, e a complexidade dos mecanismos moleculares da célula em resposta à infecção por agentes virais destaca a necessidade de compreender a bioquímica intracelular em diferentes modelos. O objetivo deste trabalho foi avaliar comparativamente a ativação das vias de sinalização NR-F2, NF-κB e AP-1 em resposta à infecção por DENV 2, ZIKV e YFV, bem como a geração de ROS e a expressão de proteínas antioxidantes, pró-inflamatórias e peroxidação lipídica (TBARS) em células murinas J774, em diferentes momentos, com um M.O.I de 5. Além disso, identificar a via de sinalização que tem mais atividade transcricional para ativar o promotor da Interleucina 6. Para isso, células J774 foram transfectadas com um conjunto de plasmídeos contendo elementos de ligação para o fator de transcrição NRF2, NF-κB e AP-1 na região promotora, e que codificam o gene luciferase, além de um plasmídeo que codifica para outro tipo de luciferase de forma constitutiva como controle de transfecção, o pRL-TK. Adicionalmente, células J774 foram transfectadas com plasmídeos contendo 651 pb da região promotora do gene da interleucina 6 com e sem modificações para a ligação dos fatores de transcrição NF-κB e AP-1. Nossos resultados mostram que os três vírus aumentaram a geração de ROS e diminuíram a atividade transcricional de NRF2, bem como a expressão das enzimas antioxidantes SOD e CAT. Ainda, houve aumento de marcadores de danos, tais como TBARS. Assim como um aumento na atividade transcricional das vias de sinalização NF-κB e AP-1, e um aumento na expressão das citocinas pró-inflamatórias TNF e IL-6. Embora mais estudos complementares sejam necessários, nossos resultados sugerem que, neste modelo de estudo, a via NF-κB é indispensável para gerar IL-6 em células J774 infectadas com DENV 2 e YFV. Já nas células infectadas com ZIKV, a expressão de IL-6 depende tanto da via de NF-κB como de AP-1.pt-BRabertohttp://creativecommons.org/licenses/by/3.0/us/VirologiaVias sinalizadorasDoenças InfecciosasDissertacaoAutorização concedida ao Repositório Institucional da UFOP pelo(a) autor(a) em 24/10/2023 com as seguintes condições: disponível sob Licença Creative Commons 4.0 que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho, desde que sejam citados o autor e o licenciante. Não permite a adaptação.