Efeitos do licopeno in vitro e in vivo sobre o desequilíbrio redox e a inflamação pulmonar induzida pela exposição à fumaça de cigarro.

Abstract

O licopeno é um carotenóide com propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias. Neste estudo, objetivou-se avaliar os efeitos in vitro e in vivo do licopeno na redução do desequilíbrio redox e na inflamação induzida pela exposição à fumaça do cigarro (FC). Para o estudo in vitro, as células J774A.1 (macrófagos) foram incubadas durante 3, 6 e 24 hs na presença de 0,5, 1,0 ou 2,0 μM de licopeno juntamente com um extrato de FC a 0,5% (EFC) e a geração de ERO intracelular foi mensurado. Para o estudo in vivo, 40 animais foram divididos em cinco grupos: um grupo de controle, exposto ao ar ambiente (GC), um grupo veículo que recebeu 200 μL de óleo de girassol por gavagem orogástrica (GO), um grupo exposto a FC, e dois grupos administrados com licopeno (diluído em óleo de girassol) nas doses de 25 ou 50 mg / kg / dia antes da exposição a FC (Li25 + FC e Li50 + FC). O tempo total dos experimentos foram de 5 e 60 dias. As concentrações de licopeno e o extrato da fumaça de cigarro (EFC) foram avaliados quanto á citotoxicidade, sendo que as concentrações de 8, 10 e 25 μM de licopeno nos tempos de 3, 6 e 24 horas apresentaram citotoxicidade, e as concentrações do EFC a partir de 0,63% até 10% também foram consideradas citotóxicas nos 3 tempos avaliados. Foi observado que as células tratadas com licopeno (1 μM ou 2 μM) e estimuladas com o EFC (0,5%) apresentaram uma diminuição da produção de ERO. No tempo de 3 horas o licopeno mimetizou o efeito do calfostin e DPI reduzindo a produção de ERO, desta forma sugere-se que o licopeno possa ter inibido uma ou ambas as vias relacionadas à produção de ERO, ou seja, PKC e/ou NADPH oxidase, respectivamente. Já em 24 horas, o licopeno não apresentou efeito modulatório sobre estas vias, uma vez que a produção de ERO foi igual as dos controles. O ensaios in vivo foram divididos em experimento a curto prazo (5 dias) e a longo prazo (60 dias), onde os camundongos foram administrados com licopeno e expostos à FC. No experimento a curto prazo, observamos um aumento no número de leucócitos totais, bem como da peroxidação lipídica, do dano ao DNA, do Vva, da translocação do Nrf2, da atividade de CAT, da razão GSH / GSSG e dos níveis de TNF-α, IFN-γ e IL-10 e a administração com licopeno foi capaz de suprimir este aumento. Em relação a Vvsa, o licopeno foi capaz de melhorar esse parâmetro, elevando a Vvsa. Em contraste, a atividade de SOD diminuiu no GFC em comparação com CG e administração com licopeno não alterou esse parâmetro. Já no experimento a longo prazo, o licopeno promoveu uma redução do número de leucócitos totais e dos parâmetros hematológicos, melhorou o quadro de enfisema pulmonar bem como o padrão histológico do parênquima pulmonar. O licopeno foi capaz de melhorar o desequilíbrio redox, diminuindo a peroxidação lipídica, o dano ao DNA e aumentou as atividades da SOD, CAT e o conteúdo de GSH, mas não apresentou diferença significativa em relação ao fator de transcrição Nrf2. Também foi observado uma diminuição dos níveis de TNF-α, IFN-γ e IL-10, bem como a atividade de MPO e o conteúdo de nitrito. Tomados em conjunto, nossos dados elucidam o papel do licopeno como um agente antioxidante e anti-inflamatório nos nossos modelos experimentais de exposição à FC.