Estudo do resíduo gerado pela indústria cervejeira artesanal, trub quente, caracterização fitoquímica e avaliação de atividades antimicrobiana e antioxidante.

Abstract

Durante o processo de produção de cerveja, grandes volumes de resíduos são gerados, e por possuírem baixo valor agregado, são destinados à alimentação animal ou eliminados diretamente no ambiente. O trub quente, segundo resíduo obtido no processo de produção de cerveja pela adição do lúpulo, é um subproduto predominantemente protéico e com quantidades consideráveis de lúpulo, entretanto, devido à baixa solubilidade de alguns compostos e/ou insuficiente extração, o trub quente pode ser considerado fonte de compostos com atividade biológica. Desta forma, os objetivos deste estudo foram realizar a caracterização química e avaliar as atividades biológicas do extrato etanólico bruto (EEB) e suas frações, frente a ensaios antimicrobianos, antioxidantes e citotóxico. Em análises realizadas por CLUE-DAD-EM/EM, foi possível sugerir a presença de alguns constituintes químicos, baseando na massa molecular e nos padrões de fragmentação estabelecidos na literatura, pertencentes à classe dos flavonoides (xanthohumol e isoxanthohumol) e compostos derivados dos β-ácidos (cohulupona, hulupona/adhulupona, epímeros de hidroxitriciclocolupona, epímeros de hidroxitriciclolupona/hidroxitricicloadlupona e nortriciclocolupona), todos provenientes do lúpulo. As análises químicas quantitativas demonstraram que o teor de compostos fenólicos nas frações BuOH (13,39±0,45 mg EAG/g) e AcOEt (12,28±0,74 mg EAG/g) foram superiores às concentrações obtidas para o EEB e fração Hex. No entanto, as concentrações de flavonoides totais foram maiores nas frações menos polares, não diferindo estatisticamente, entre EBB e frações Hex e AcOEt (1,31±0,19 mg EQ/g, 1,17±0,16 mg EQ/g, 1,64±0,32 mg EQ/g, respectivamente). Na atividade antioxidante, observaram-se valores inferiores de CE50, obtidos para as frações, quando determinados pelo método ABTS. Foi constada, através de teste de correlação de Spearman, a necessidade de utilização de mais de uma metodologia para determinação da atividade antioxidante, devido a não proporcionalidade dos resultados apresentados pelos métodos ABTS e DPPH. Baixa e/ou negativa correlação, não significante, foi obtida entre os teores de compostos fenólicos e flavonoides totais e a atividade antioxidante, através do teste de correlação de Spearman, indicando que a atividade resultante não se relaciona majoritariamente com compostos pertencentes a estas classes. A atividade antimicrobiana, determinada pelos métodos de difusão em ágar e microdiluição em caldo, revelaram que todos os extratos foram capazes de inibir o crescimento de pelo menos um microrganismo testado, sendo menores valores de CIM e maiores %AAT, encontrados para a fração Hex, contra bactérias Gram-positivas. Observou-se que a AAT do EEB foi, em geral, foi superior à soma da AAT das frações (ΣAAT), indicando, no entanto, que não houve uma ação sinérgica entre os componentes das frações. Correlações majoritárias, fracas e/ou negativas, porém, não significativas, foram observadas entre os teores de compostos fenólicos e flavonoides totais e a atividade antimicrobiana, determinadas pelo teste de correlação de Spearman, indicando, que esses compostos não são majoritariamente responsáveis pela atividade apresentada. Através da CI50 (0,76±0,2 mg/mL) obtida para fração Hex, avaliada em células de fibroblastos L929, foi possível constatar alta atividade inibitória contra bactérias gram-positivas, uma vez que a mesma apresentou CIM inferiores à CI50 para todas as bactérias, exceto para E. faecium. Esses resultados mostram-se promissores e indicam um grande potencial da aplicação de compostos presentes na fração Hex para futuros estudos para tratamento de infecções causadas por S. aureus, S. aureus MARSA, S. saprophyticus, L. monocytogenes e E. faecalis.