Avaliação do potencial de peptídeos sintéticos de Leishmania infantum para o diagnóstico da Leishmaniose visceral canina.

Abstract

No Brasil, o combate à Leishmaniose Visceral Canina (LVC) ainda enfrenta grandes desafios, grande parte deles são baseados no desempenho limitado dos testes diagnósticos empregados pelo protocolo atual do Ministério da Saúde. No presente estudo, avaliamos o desempenho de peptídeos selecionados por imunoinformática, como alternativa ao diagnóstico sorológico da LVC. Para avaliação dos peptídeos foi realizado um ensaio imunoenzimático em um conjunto heterogêneo de amostras de soro (n = 113), sendo composto por animais infectados por Leishmania infantum em diferentes formas clínicas, bem como animais não infectados. Além disso, foram inclusas amostras de cães com outras infecções (Erhlichia canis, Babesia Canis e Trypanosoma cruzi) e animais imunizados pela vacina comercial LeishTec® e uma promissora candidata vacinal desenvolvida pelo nosso grupo de pesquisas, a LBSap. Nossos resultados indicam alta acurácia dessa abordagem, o que pode ser demonstrado pelos valores de sensibilidade tanto dos peptídeos isolados quanto em combinação que atingiram valores entre 86,4% a 100%, além dos valores de especificidade, que alcançaram resultados próximos ou superiores a 90% em todos os ensaios. Observamos que os peptídeos são capazes de detectar corretamente a maioria dos animais infectados por L. infantum independente da forma clínica, destacando-se na detecção de todos os animais assintomáticos pelo peptídeo 48 e o Mix. Além disso, notamos que os peptídeos não apresentaram reatividade nas amostras de animais infectados por T. cruzi, entretanto o Mix dos peptídeos apresentou redução da reatividade cruzada em todas as infecções caninas analisadas, apresentando acurácia de 89,5% nas análises executadas contra 68,1% do ensaio realizado com antígeno solúvel de Leishmania infantum (ASLi). Destacamos também a baixa reatividade dos peptídeos quando analisadas amostras de cães vacinados, observando redução de resultados falso-positivos quando comparado ao ASLi. Enfatizamos, mais uma vez, o desempenho do Mix frente a tais amostras, sendo observada ausência de reatividade quando a combinação dos peptídeos foi empregada em soros de animais vacinados. Nossos resultados indicam o potencial uso da imunoinformática para identificação de alvos promissores para o diagnóstico da LVC e abrem uma perspectiva importante da aplicação de peptídeos sintéticos como alternativa para o uso no diagnóstico sorológico para da doença.