Efeito de ectonucleotidases de Leishmania sobre a produção de IL-1β em células dendríticas.

Abstract

Células dendríticas (DC) são essenciais para a montagem da resposta imune inata e para a conexão das respostas inata e adquirida, inclusive durante a infecção por Leishmania. Vários estudos têm apresentado a importância da sinalização purinérgica, como o papel das ENTPDases do parasito, no processo de infecção. O objetivo deste trabalho foi avaliar se Leishmania com variações na atividade ENTPDase são capazes de modular a produção de IL1β por células dendríticas. A atividade ectonucleotidásica foi avaliada pela hidrólise de fosfato inorgânico por incubação de formas promastigotas metacíclicas de L. amazonensis e L. major com ATP, ADP ou AMP. Observamos que ambas apresentam semelhante atividade enzimática. Avaliamos a correlação entre liberação de IL-1β por DC infectadas por Leishmania e tratadas com LPS e ATP e atividade enzimática de Leishmania e verificamos que houve forte correlação, sobretudo sobre ATP e ADP. Além disso, uma vez reduzida a atividade enzimática, houve uma redução do percentual de células infectadas. Como adenosina poderia estar envolvida no processo de indução da liberação de IL-1β verificamos que o tratamento de DC com análogo de adenosina aumentou a liberação de IL-1β. Verificamos, ainda, que o tratamento com inibidores dos receptores de adenosina, SCH 58261 (receptor A2a) e MRS 1454 (receptor A2b) foi capaz de reduzir significativamente a liberação de IL-1β por DC infectadas. Não obstante, verificamos o envolvimento do receptor P2X7 no processo de geração de IL-1β e analisamos que o bloqueio do receptor por P2X7 suficiente para reduzir a liberação de IL-1β pelas DC infectadas tanto por L. amazonensis como por L. major. Concluímos que a ENTPDase de Leishmania é um importante fator de virulência, capaz de induzir a hidrólise de ATP para geração de adenosina e estimular o possível curso da infecção em favor do parasito pela produção de IL-1β.