Navegando por Autor "Teixeira, Janaina Aparecida"
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Item Detailed search for protein kinase(s) involved in plasma membrane H+-ATPase activity regulation of yeast cells.(2015) Pereira, Renata Rebeca; Castanheira, Diogo Dias; Teixeira, Janaina Aparecida; Bouillet, Leoneide Érica Maduro; Ribeiro, Erica Milena de Castro; Trópia, Maria José Magalhães; Alvarez, Florencia; Correa, Lygia Fátima da Mata; Mota, Bruno Eduardo Fernandes; Conceição, Luís Eduardo Fernandes Rodrigues da; Castro, Ieso de Miranda; Brandão, Rogélio LopesThis study displays a screening using yeast strains deficient in protein kinases known to exist in Saccharomyces cerevisiae. From 95 viable single mutants, 20 mutants appear to be affected in the glucose-induced extracellular acidification. The mutants that are unaffected in calcium signaling were tested for their sensitivity to hygromycin B. Furthermore, we verified whether the remaining mutants produced enzymes that are appropriately incorporated at plasma membrane. Finally, we measure the kinetic properties of the enzyme in purified plasma membranes from glucose-starved as well as glucose-fermenting cells. We confirmed the kinase Ptk2 involvement in H+−ATPase regulation (increase of affinity for ATP). However, the identification of the kinase(s) responsible for phosphorylation that leads to an increase in Vmax appears to be more complex. Complementary experiments were performed to check how those protein kinases could be related to the control of the plasma membrane H+−ATPase and/or the potential membrane. In summary, our results did not permit us to identify the protein kinase(s) involved in regulating the catalytic efficiency of the plasma membrane H+−ATPase. Therefore, our results indicate that the current regulatory model based on the phosphorylation of two different sites located in the C-terminus tail of the enzyme could be inappropriate.Item Draft genome sequence of Wickerhamomyces anomalus LBCM1105, isolated from cachaça fermentation.(2020) Cunha, Aureliano Claret da; Santos, Renato Augusto Corrêa dos; Pachón, Diego Mauricio Riaño; Squina, Fábio Márcio; Oliveira, Juliana Velasco de Castro; Goldman, Gustavo Henrique; Souza, Aline Tieppo de; Gomes, Lorena Soares; Santos, Fernanda Godoy; Teixeira, Janaina Aparecida; Oliveira, Fábio Faria; Cruz, Izinara Rosse da; Castro, Ieso de Miranda; Lucas, Cândida; Brandão, Rogélio LopesWickerhamomyces anomalus LBCM1105 is a yeast isolated from cachaça distillery fermentation vats, notable for exceptional glycerol consumption ability. We report its draft genome with 20.5x in-depth coverage and around 90% extension and completeness. It harbors the sequences of proteins involved in glycerol transport and metabolism.Item High‑affinity transport, cyanide‑resistant respiration, and ethanol production under aerobiosis underlying efficient high glycerol consumption by Wickerhamomyces anomalus.(2019) Cunha, Aureliano Claret da; Gomes, Lorena Soares; Santos, Fernanda Godoy; Oliveira, Fábio Faria; Teixeira, Janaina Aparecida; Sampaio, Geraldo Magela Santos; Trópia, Maria José Magalhães; Castro, Ieso de Miranda; Lucas, Cândida Manuel Ribeiro Simões; Brandão, Rogélio LopesWickerhamomyces anomalus strain LBCM1105 was originally isolated from the wort of cachaça (the Brazilian fermented sugarcane juice-derived Brazilian spirit) and has been shown to grow exceptionally well at high amounts of glycerol. This paramount residue from the biodiesel industry is a promising cheap carbon source for yeast biotechnology. The assessment of the physiological traits underlying the W. anomalus glycerol consumption ability in opposition to Saccharomyces cerevisiae is presented. A new WaStl1 concentrative glycerol-H+ symporter with twice the affinity of S. cerevisiae was identified. As in this yeast, WaSTL1 is repressed by glucose and derepressed/induced by glycerol but much more highly expressed. Moreover, LBCM1105 aerobically growing on glycerol was found to produce ethanol, providing a redox escape to compensate the redox imbalance at the level of cyanide-resistant respiration (CRR) and glycerol 3P shuttle. This work is critical for understanding the utilization of glycerol by non-Saccharomyces yeasts being indispensable to consider their industrial application feeding on biodiesel residue.Item Identificação de um gene, provavelmente envolvido no transporte ativo de glicerol em Wickerhamomyces anomalus (Pichia anomala).(2015) Gomes, Lorena Soares; Brandão, Rogélio Lopes; Teixeira, Janaina Aparecida; Castro, Ieso de Miranda; Nicoli, Jacques RobertExistem micro-organismos capazes de utilizar o glicerol como fonte de carbono e energia, sendo assim, bastante atrativos como bioconversores do glicerol bruto gerado a partir da produção de biodiesel. Em Saccharomyces cerevisiaea via de metabolização do glicerol é bem definida, em que um sistema simporte de prótons, codificado pelo gene STL1, é preferencialmente utilizado na captação do glicerol quando fontes fermentáveis de carbono não estão presentes. O presente trabalho objetivou identificar o gene STL1 que codifica um provável transportador de glicerol em Wickerhamomyces anomalus LBCM105, cujo o genoma ainda não se encontra disponível em banco de dados. O gene identificado apresentou 1443 pb e 480 aminoácidos. A análise in sílico comparativa da região promotora identificou fatores de transcrição putativos associados à regulação de STL1 de W. anomalus LBCM105 e S. cerevisiae, sugerindo uma notável distinção entre os elementos putativos de ambos. A análise da arvore filogenética, construída a partir das sequências de proteínas Stl1 de diferentes leveduras, evidenciou uma maior similaridade entre o transportador putativo de W. anomalus LBCM105 e W. ciferrii, e uma maior distância em relação a S. cerevisiae. Após caracterização do gene STL1 de W. anomalus LBCM105, foram realizados análises da expressão gênica deste em condições de cultivo contendo glicose ou glicerol, como fonte de carbono. O gene STL1 apresentou uma expressão 23,76 vezes maior em glicerol em relação à condição de meio contendo glicose. A avaliação do transporte de glicerol pela W. anomalus LBCM105 evidenciou um transporte ativo em condições de cultivo contendo glicose ou glicerol, no entanto, Stl1p foi induzida em presença de glicerol. Os resultados apresentaram dados relevantes quanto à possível identificação do transportador de glicerol em W. anomalus LBCM105, evidenciando um potencial significativo na aplicação biotecnológica quanto ao consumo de glicerol bruto, resíduo da indústria de biodiesel, uma vez que demonstrou ser bastante eficiente na captação de glicerol.