Navegando por Autor "Leal, Gleisiane Gomes de Almeida"
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Item Biomarcadores de resistência e suscetibilidade à leishmaniose visceral em cães naturalmente infectados por Leishmania (Leishmania) infantum provenientes de área endêmica.(2013) Leal, Gleisiane Gomes de Almeida; Reis, Alexandre BarbosaA leishmaniose visceral (LV) tem grande impacto na saúde pública e cães são considerados os principais reservatórios domésticos do parasito. Estudos longitudinais em área endêmica tem demonstrado que a história natural da LV canina (LVC), pode manifestar-se num amplo espectro clínico, desde infecção assintomática até a forma sintomática. Nos últimos anos tem sido observado que cães assintomáticos e soronegativos podem apresentar-se PCR positivo e, estes animais são classificados como CA-I. Interessantemente estes cães apresentam um perfil de resposta imune diferenciado em comparação aos assintomáticos soropositivos (CA-II). Neste contexto, a busca de biomarcadores de progressão clínica é essencial para uma melhor compreensão dos mecanismos imunológicos associados a um perfil de resistência e/ou suscetibilidade na LVC. Neste trabalho, 159 cães de área endêmica, naturalmente infectados por L. infantum, foram distribuídos em quatro grupos de acordo com a forma clínica e os resultados do diagnóstico sorológico e molecular: (i) cães assintomáticos soronegativos/PCR+ para L. infantum (CA-I); (ii) cães assintomáticos soropositivos (CA-II); (iii) cães sintomáticos soropositivos (CS) e (iv) grupo controle (CN) cães sem sinais clínicos com resultados sorológicos e moleculares negativos. Além dos parâmetros hematológicos, uma análise detalhada da resposta celular, através da citometria de fluxo, no contexto ex vivo, foi realizada. Linfócitos T (CD5+, CD4+ e CD8+), células B (CD21+) e monócitos (CD14+) circulantes foram os fenótipos celulares investigados. Adicionalmente, foram realizados estudos in vitro empregando-se biomarcadores de resistência e suscetibilidade para a LVC, relacionados à produção intracitoplasmática de IFN- e IL-4+ por neutrófilos, eosinófilos e linfócitos T (CD4+ e CD8+). Nossos resultados confirmam que a progressão da doença induz anemia, caracterizada pela redução de hemácias, hemoglobina e hematócrito. Já na série branca, foi observado aumento na população de neutrófilos bastonetes e redução de eosinófilos, monócitos e linfócitos. A investigação da resposta imune, baseada no perfil imunofenotípico de células mononucleares do sangue periférico (CMSP), mostrou uma redução no número absoluto de linfócitos T CD5+, e suas subpopulações (CD4+ e CD8+), bem como uma queda no número dos linfócitos B CD21+ e monócitos CD14+ nos animais soropositivos (CA-II e CS). Neutrófilos quando estimulados com antígeno solúvel de L. infantum (ASLi), aumentaram a síntese de IFN-γ+ nos grupos CA-II e CS e diminuíram a produção de IL-4+ no grupo CA-I. Já nos grupos CA-II e CS, as subpopulações de linfócitos T (CD4+ e CD8+), tanto na cultura controle quanto na estimulada com ASLi, também apresentaram uma maior síntese de IFN-γ+ e IL-4+. Estes resultados sugerem que os animais dos grupos CA-II e CS apresentam um perfil imunológico misto (Tipo 1 e 2). Por outro lado, os animais do grupo CA-I não diferem dos animais do grupo CN conferindo a este grupo um perfil de resistência, uma vez que não ocorre queda em nenhuma das populações avaliadas, bem como não há ativação do Tipo 2 com produção de IL-4+. Já os animais do grupo CA-II e principalmente do grupo CS apresentam uma imunossupressão, que acomete tanto o compartimento T como B, além de queda de monócitos circulantes, concomitante a presença de IFN-γ+ e IL-4+ produzidas por neutrófilos e linfócitos T tornando-os incapazes de controlar a replicação parasitária.Item Efetividade da coleira impregnada com deltametrina na redução da incidência da leishmaniose visceral canina.(2017) Leal, Gleisiane Gomes de Almeida; Reis, Alexandre Barbosa; Vital, Wendel Coura; Lana, Marta de; Coelho, George Luiz Lins Machado; Neves, Vera Lúcia Fonseca de Camargo; Barata, Ricardo AndradeA leishmaniose visceral (LV) é uma zoonose que se encontra em grande expansão no Brasil. A doença tem como principal vetor o Lutzomyia longipalpis e como reservatório o cão. Uma das medidas empregadas pelo Programa de Vigilância e Controle da LV no Brasil é a eutanásia de cães sororeativos. Diante disto, é essencial buscar outras estratégias para evitar a eutanásia de cães e conter a expansão da doença. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a efetividade da coleira impregnada com deltametrina na redução da incidência de infecção canina por L. infantum. Neste sentido, foi realizado um estudo de intervenção não randomizado em cães da área urbana, de elevada endemicidade do município de Governador Valadares localizado no leste do estado de Minas Gerais. Durante a linha de base do estudo foram avaliados 5.851 cães e a taxa de prevalência de leishmaniose visceral canina (LVC) foi de 21,9% (IC95% 21,0-23,1). Os animais soronegativos foram elegíveis para participação no estudo [n=3.797 (1.866 no grupo coleira e 1.931 no sem coleira)]. Os proprietários dos cães responderam a um questionário contendo informações sobre condições socioeconômicas, de moradia, do peridomicílio e sobre o comportamento do animal. A incidência da infecção canina nos grupos avaliados após 12 meses foi de 5,5/1000 cães/mês na área com coleira e 13,2/1000 cães/mês na área sem coleira. A efetividade da coleira na redução da incidência da infecção após 12 meses foi de 50,8% quando analisada por intenção de tratar. Já por protocolo, a incidência foi de 5,1 e 13,2 cães/mês nas áreas coleira e sem coleira, respectivamente, com uma efetividade de 61,4%. Já através do modelo de Cox a efetividade analisada por intenção de tratar foi de 50% ajustado pelas variáveis presença de folhas no quintal; onde o cão fica: quintal/canil/casinha/outros lugares; se o cão foge para rua e usa shampoo contra pulgas e carrapatos e 60% ajustada por presença de folhas no quintal; presença de outros animais; moradores com escolaridade do ensino médio ao superior completo; onde o cão fica: quintal/canil/casinha/outros lugares e se o cão usa shampoo contra pulgas e carrapatos, quando analisada por protocolo. Os resultados apresentados demonstram que a leishmaniose visceral reemergiu em Governador Valadares/MG, cidade que já foi considerada uma área endêmica controlada da doença. Além disso, podemos concluir que quando o animal usa regularmente a coleira impregnada com deltametrina a efetividade da coleira aumenta consideravelmente. É importante ressaltar que a efetividade após maior tempo de acompanhamento possivelmente será superior, visto que animais que se encontravam na janela imunológica podem não ter sido removidos do estudo com os testes sorológicos de triagem.Item Effectiveness of deltamethrin-impregnated dog collars on the incidence of canine infection by Leishmania infantum : a large scale intervention study in an endemic area in Brazil.(2018) Vital, Wendel Coura; Leal, Gleisiane Gomes de Almeida; Marques, Luana Araújo; Pinheiro, Aimara da Costa; Carneiro, Mariângela; Reis, Alexandre BarbosaTo reduce morbidity and mortality caused by visceral leishmaniasis (VL), the Brazilian Visceral Leishmaniasis Control and Surveillance Program promotes the diagnosis and treatment of cases, vector control, euthanasia of seropositive dogs, and health education. Nevertheless, the effectiveness of these measures is questionable as they lead to little reduction in the transmission of the disease. Thus, the effectiveness of strategies such as insecticide-impregnated collars, spot-on insecticides, and immunization of dogs should be assessed. Herein, we evaluated the effectiveness of deltamethrin-impregnated collars on reducing the incidence of Leishmania infantum infection in dogs living in an endemic area of VL. An intervention study was conducted and a total 5,850 dogs were analyzed in baseline. Of these 3,742 seronegative dogs were divided into two groups: collared and uncollared (control). Dogs were followed for 12 months and three interventions were performed. The Cox regression model was used to evaluate the effectiveness of the collar. All analyzes were performed by Intention-to-treat and per-protocol. By intention-to-treat, the incidence rates of L. infantum infection were 7.5 and 7.9 in the collar group, and 6.5 and 13.2 per 1,000 dogs-months in the control group after 6 and 12 months, respectively. In the per-protocol analysis, the incidence rates in the control group were similar to those observed in the intention-to-treat analysis. In the collar group, the incidence rate was 5.1/1,000 dogs-months after 6 and 12 months. The effectiveness by intention-to-treat after adjustment by the multivariate Cox model was 48%. In the analysis per-protocol, the effectiveness increased to 63%. Although collar use was effective when it was evaluated by intention-to-treat, higher effectiveness was found in the per-protocol analysis after one year of follow-up. The data emphasize the importance of the uninterrupted use of deltamethrin-impregnated collars to increase protection against canine VL.Item Evaluation of change in canine diagnosis Protocol adopted by the visceral Leishmaniasis control program in Brazil and a new proposal for diagnosis.(2014) Vital, Wendel Coura; Ker, Henrique Gama; Roatt, Bruno Mendes; Soares, Rodrigo Dian de Oliveira Aguiar; Leal, Gleisiane Gomes de Almeida; Moreira, Nádia das Dores; Oliveira, Laser Antônio Machado de; Machado, Evandro Marques de Menezes; Morais, Maria Helena Franco; Oliveira, Rodrigo Corrêa de; Carneiro, Mariângela; Reis, Alexandre BarbosaThe techniques used for diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL) in Brazil ELISA and IFAT have been extensively questioned because of the accuracy of these tests. A recent change in the diagnosis protocol excluded IFAT and included the Dual-Path Platform (DPP). We evaluated the prevalence and incidence rates of Leishmania spp. before and after the change in the protocol. In addition, based on our results, we propose a new alternative that is less expensive for the screening and confirmation of CVL. Plasma samples were obtained from a serobank from dogs evaluated in a cross-sectional study (1,226 dogs) and in a cohort study of susceptible animals (n = 447), followed for 26 months. Serology testing wasperformed using ELISA, IFAT, and DPP. The incidence and prevalence of CVL were determined by using the protocol of the Visceral Leishmaniasis Control and Surveillance Program until 2012 (ELISA and IFAT using filter paper) and the protocol used after 2012 (DPP and ELISA using plasma). The prevalence was 6.2% and the incidence was 2.8 per 1,000 dog-months for the protocol used until 2012. For the new diagnosis protocol for CVL resulted in an incidence of 5.4 per 1,000 dog-months and a prevalence of 8.1%. Our results showed that the prevalence and incidence of infection were far greater than suggested by the previously used protocol and that the magnitude of infection in endemic areas has been underestimated. As tests are performed sequentially and euthanasia of dogs is carried out when the serological results are positive in both tests, the sequence does not affect the number of animals to be eliminated by the Control Program. Then we suggest to municipalities with a large demand of exams to use ELISA for screening and DPP for confirmation, since this allows easier performance and reduced cost.Item Immunological profile of resistance and susceptibility innaturally infected dogs by Leishmania infantum.(2014) Leal, Gleisiane Gomes de Almeida; Roatt, Bruno Mendes; Soares, Rodrigo Dian de Oliveira Aguiar; Carneiro, Cláudia Martins; Giunchetti, Rodolfo Cordeiro; Carvalho, Andréa Teixeira de; Martins Filho, Olindo Assis; Francisco, Amanda Fortes; Cardoso, Jamille Mirelle de Oliveira; Mathias, Fernando Augusto Siqueira; Oliveira, Rodrigo Corrêa de; Carneiro, Mariângela; Vital, Wendel Coura; Reis, Alexandre BarbosaVisceral leishmaniasis has a great impact on public health, and dogs are considered the maindomestic reservoir of Leishmania infantum, the causal parasite. In this study, 159 animalsnaturally infected by L. infantum from an endemic area of Brazil were evaluated through ananalysis of cellular responses, using flow cytometry, and of the hematological parameters.The results confirmed that disease progression is associated with anemia and reductionsin eosinophils, monocytes and lymphocytes. The investigation of the immune response,based on the immunophenotypic profile of peripheral blood, showed declines in the abso-lute numbers of T lymphocytes CD5+and their subsets (CD4+and CD8+) and a drop of Blymphocytes in asymptomatic seropositive (AD-II) and symptomatic seropositive (SD) dogs.Neutrophils, when stimulated with soluble antigen of L. infantum, showed higher synthesisof interferon (IFN)- _+in AD-II and SD groups, with decreased production of interleukinItem Risk factors for seroconversion by Leishmania infantum in a cohort of dogs from an endemic area of Brazil.(2013) Vital, Wendel Coura; Reis, Alexandre Barbosa; Fausto, Maria Arlene; Leal, Gleisiane Gomes de Almeida; Marques, Marcos José; Veloso, Vanja Maria; Carneiro, MariângelaVisceral leishmaniasis (VL) has recently emerged in various urban and peri-urban areas of Brazil and other countries. Understanding the urbanization of VL requires identification of risk factors associated with human and canine infection. To determine the predictors of risk for canine VL, a survey was conducted of 1,443 dogs, from which a cohort was selected (n = 455) and evaluated for approximately 26 months. Serology was conducted with two enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA): one conducted in the Laboratory of Zoonosis of the Belo Horizonte Health Department (LZOON) and the other in the Laboratory of Immunopathology of the Federal University of Ouro Preto (LIMP). A molecular diagnostic method (PCR–restriction fragment length polymorphism) and a structured questionnaire were also used. To identify the factors associated with seroconversion, two time-dependent Cox regression models were performed with different sensitivities (model 1, seroconversion by ELISA/LZOON; model 2, seroconversion by ELISA/LIMP). The overall incidences of seroconversion were 6.5/1000 dogs-months and 11.2/1000 dogs-months for ELISA/LZOON and ELISA/LIMP, respectively. Increased risk of seroconversion was associated with short fur (model 1: hazard ratio [HR] 1.9), the presence of dry leaves (model 1: HR 2.8) or manure (model 1: HR 3.5) in the backyard, dogs sleeping predominantly in the backyard (model 2: HR 2.1), the presence of symptoms (model 2: HR 2.0), and positive molecular results during follow-up (model 2: HR 1.5). Decreased risk was associated with insecticide spraying in the house (model 2: HR 0.5). These results indicate that morevulnerable domiciles, certain dog behaviors, lack of vector control measures, and positive molecular results were associated with the occurrence of canine VL. Furthermore, it is important to emphasize that PCR-positive dogs should be monitored, owing to the possibility of seroconversion. Identifying risk factors for seroconversion in dogs is crucial for developing adequate strategies for VL prevention and control.Item Risk profile for Leishmania infection in dogs coming from an area of visceral leishmaniasis reemergence.(2018) Leal, Gleisiane Gomes de Almeida; Carneiro, Mariângela; Pinheiro, Aimara da Costa; Marques, Luana Araújo; Ker, Henrique Gama; Reis, Alexandre Barbosa; Vital, Wendel CouraUntil the 1980s, visceral leishmaniasis was concentrated in poor rural areas of Brazil. The Vale do Rio Doce, located in the Southeastern Brazilian state of Minas Gerais, was an endemic area with high numbers of human and canine cases. Prophylactic measures adopted since the 1960s reduced the number of cases and the region became a ‘controlled endemic’ area. In the early 1990s, however, the program was interrupted, and the human disease reemerged in 2008. This cross-sectional study evaluated the prevalence and the risk profile of infection of dogs with Leishmania spp in this reemergence area of visceral leishmaniasis. Among a population of approximately 280,000 people, a total of 3835 dog owners were interviewed about socioeconomic conditions, housing, peridomicile features, and their dogs’ characteristics and behavior. Blood samples were collected from 5822 dogs of an estimated canine population of 20,000 and anti-Leishmaniasis antibodies were identified using Dual-Path Platform and ELISA. We observed that 1282 of the 5822 dogs were seropositive for the protozoan indicating a seroprevalence of 22%. The risk factors associated with Leishmania infection in dogs were: non-paved backyard (OR 1.4; 95%CI 1.2–1.7); the presence of dry leaves and decaying fruit in the backyard (OR 1.3; 95%CI 1.1–1.5); medium-sized (OR 1.3; 95% 1.1–1.5) or big-sized dogs (OR 1.8; 95%CI 1.5–2.3); short-haired dogs (OR 1.8; 95%CI 1.5–2.1); dogs that slept in the backyard (OR 2.6; 95%CI 1.8–3.6) or in the balcony (OR 1.6; 95%CI 1.1–2.3); and history of canine visceral leishmaniasis in the household (OR 1.3; 95%CI 1.1–1.5). Our results suggest a strong reemergence of canine visceral leishmaniasis after the discontinuation of the control programs. Also, the observed risk factors reinforce the role of health education and environmental management measures to the effective control of the disease.