Navegando por Autor "Dorim, Diego Dias Ramos"
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Item Avaliação de nanocápsulas contendo o eremantolídeo c contra o parasito T. cruzi “in vitro” e na doença de chagas experimental.(Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. CIPHARMA, Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto., 2010) Dorim, Diego Dias Ramos; Mosqueira, Vanessa Carla FurtadoNeste estudo o desenvolvimento de uma formulação nanoestruturada do eremantolídeo C (EREC) foi realizado visando o estudo de sua atividade contra o Trypanosoma cruzi. O EREC é uma substância lipofílica isolada de Lychnophora trichocarpha Spreng previamente testada in vitro contra este parasito. Para a obtenção de nanocápsulas poliméricas contendo um núcleo oleoso para carreamento do EREC utilizou-se o método de deposição interfacial de um polímero pré-formado. Nanocápsulas de poly-ε-caprolactona (PCL) com diâmetro médio de 194,63 ± 2,83nm e porcentagem de encapsulação de 82,59 ± 2,40% foram obtidas, confirmando a afinidade entre EREC e núcleo oleoso. Foram ainda desenvolvidos e validados dois métodos de quantificação usando CLAE com detector de arranjos de diiodo (DAD) e espectrofotometria no UV para quantificação do EREC a 265nm em formas farmacêuticas nanoestruturadas. A técnica de CLAE permitiu a quantificação do EREC até o limite de quantificação (LOQ) de 1μg/mL e a de espectrofotometria com o (LOQ) de 5μg/mL. Estudos de liberação mostraram uma liberação prolongada e reduzida do EREC a partir das nanocápsulas com quantidade liberada inferior a 75% em 48 horas, enquanto a quantidade dissolvida da substância livre foi superior a 93% em 12 horas. Uma metodologia para determinação da atividade in vitro contra as formas epimastigotas do parasito foi otimizada e validada usando adaptação do método de MTT que demonstrou ser preciso e exato e rápido para o screening de novas substâncias, potencialmente ativas contra parasitos da família Trypanosomatidae. Nos estudos in vitro, foi verificado um efeito dose-dependente tanto para o EREC livre quanto nanoencapsulado entre as concentrações de 10-100μg/mL, sendo observada na concentração de 100μg/mL uma inibição do crescimento dos parasitos próximo de 100%. Os estudos in vivo mostraram ser a via oral inadequada para administração de EREC livre ou em nanocápsulas, uma vez que não se observou atividade sobre os parasitos na concentração de 500mg/Kg. A administração do EREC livre ou nanoencapsulado por via intravenosa (10mg/mL) reduziu significativamente a parasitemia e aumentou a sobrevida dos animais infectados, mas não foi tão eficiente como o benznidazol pela mesma via. Os dados sugerem que doses maiores de EREC possam ser administradas na forma nanoencapsulada com potencial aumento de eficácia em relação ao esquema terapêutico utilizado neste estudo.Item HPLC-DAD and UV-Spectrophotometry for the determination of lychnopholide in nanocapsule dosage dorm : validation and application to release kinetic study.(2012) Branquinho, Renata Tupinambá; Mosqueira, Vanessa Carla Furtado; Kano, Eunice Kazue; Souza, Jacqueline de; Dorim, Diego Dias Ramos; Guimarães, Dênia Antunes Saúde; Lana, Marta deSimple and sensitive methods using high-performance liquid chromatography– diode array detection (HPLC–DAD) and ultraviolet (UV)–spectrophotometry were developed and compared to quantify lychnopholide (LYC) in poly-1-caprolactone nanocapsules and to study its release kinetics. Both methods were validated concerning their specificity, linearity, limits of detection and quantification, precision, accuracy and stability. HPLC–DAD analyses were conducted using an RP C18 column, isocratic elution with a methanol–water (60:40 v/v) mobile phase at 0.8 mL/min flow rate and detection at 265 nm. The linear response (r2 > 0.999) was obtained within a concentration range of 2–25 mg/mL using HPLC–DAD and 5– 40 mg/mL using spectrophotometry. Intra-day and inter-day precision were obtained with low relative standard deviation values. The accuracy of the methods was within the range 98–101% for HPLC–DAD and from 96–100% for UV–spectrophotometry. Both methods were suitable to be applied for the determination of drug loading percentage (>96%) and encapsulation efficiency (>90%). Furthermore, the sensitivity of HPLC–DAD method allows studies of LYC release/dissolution in sink conditions. LYC presented 100% dissolution after 24 h, whereas only 60% of LYC was released from the nanocapsule dosage form, with no burst effect. The methods fulfilled all validation parameters evaluated for LYC quantification in the polymeric nanocapsules and have proven to be accurate, selective and sensitive in the previously mentioned applications.